大鼠腎臟原位移植手術(shù)方法:
手術(shù)在室溫25 、相對濕度60%的清潔非無菌環(huán)境中進(jìn)行。
1.110%鹽酸氯胺酮注 射液和硫酸阿托品、酚妥拉明注射液、 肝素鈉注射液、利多卡因注射液。
1.2 麻醉方法 10%鹽酸氯胺酮注 射液,15 mg(100 g)-1,肌肉注射麻醉,術(shù)中注意保溫。
1.3 科技術(shù)從供體切取雙側(cè)腎臟,放入4 腎臟保存液。左側(cè)腎臟植入 個(gè)受體,原位端端縫合腎臟動、靜脈,供腎輸尿管與受體輸尿管上端間斷縫合6 針。右側(cè)腎臟翻轉(zhuǎn)180后植入第2 個(gè)受體左側(cè)腎窩, 與受體的動脈、靜脈、輸尿管端端吻合。
1.3.1 供體手術(shù) 取十字切 口進(jìn)腹,濕鹽水紗布包裹腸管。仔細(xì)分離供體右側(cè)和左側(cè)腎臟的動、 靜脈血管,分別結(jié)扎腎上腺動靜脈,并使腎臟的動、靜脈血管骨骼化, 利多卡因注射液滴于表面防止動脈痙攣。游離腎臟和輸尿管,輸尿管 在腎臟下極處離斷,保留輸尿管周圍的脂肪組織。在切取腎臟之前 15 min,通過尾靜脈注射肝素100 和甲磺酸酚妥拉明注射液(1mgkg-1)。在根部結(jié)扎左腎動靜脈并離斷,提起腎動脈外膜, 插入4 號灌注針進(jìn)行灌注,灌注液為4 腎臟離體灌注保存液約2 ml 。同法切取灌注右側(cè)腎臟,在根部離 斷右腎動脈,帶部分腔靜脈壁剪取右腎靜脈,保留右輸尿管約2 cm。 兩側(cè)腎臟分別放入4 HCA腎臟灌注保存液中備用。
1.3.2受體準(zhǔn)備 劍突下正中切口進(jìn)腹,濕鹽水紗布包裹 腸管牽向右側(cè)。仔細(xì)分離受體左側(cè)腎臟的動、靜脈,分別結(jié)扎腎上腺 動靜脈。游離腎臟,在靠近腹主動脈、腔靜脈處用顯微血管夾阻斷左 側(cè)腎臟的動、靜脈血管,盡量靠近腎門處離斷左側(cè)腎臟的動、靜脈血 管和輸尿管。冰肝素鹽水沖洗動、靜脈管腔。
1.3.3 左側(cè)腎臟原位 移植 左側(cè)供腎置于受體的左側(cè)后腹壁腎窩,冰鹽水紗布墊 起并覆蓋,間斷滴注冰鹽水保持低溫,先吻合動脈,直徑一般0.5 0.8mm,牽開外膜修齊動脈的末端。端端吻合動脈8~9 針,兩定點(diǎn) 縫合,采用連續(xù)縫合間斷打結(jié)的方法,一般前壁3 針后壁3 針。靜脈 的直徑1~1.5 mm,壁薄而嬌嫩。180兩定點(diǎn)固定,端端連續(xù)縫合, 開放血流后再收緊打結(jié)防止形成狹窄。先開放靜脈再開放動脈。輸尿 管的吻合:吻合口靠近受體輸尿管上端,一般需要6 針間斷縫合,2 針對端全層牽引線,前后壁分別2 針。通過輸尿管的蠕動波、尿液通過吻合口來判斷是否漏尿。
1.3.4 右側(cè)腎臟移植側(cè)供腎圍繞其長軸旋轉(zhuǎn)180,其凸起的腹側(cè)面靠近左側(cè)腎窩后腹壁。因翻轉(zhuǎn)后原右側(cè)腎靜脈靠近背側(cè),一般先吻合靜脈再吻合動脈,方法 同左側(cè)供腎。右側(cè)供腎的冷缺血時(shí)間0 min。腎靜脈、腎動脈、輸尿 管吻合方法同左側(cè)供腎。
1.3.5 術(shù)后處理 縫合移植腎臟上下極的包 膜脂肪于腹后壁,以固定移植腎臟,防止血管蒂扭轉(zhuǎn)。分離受體右側(cè) 的腎臟血管,結(jié)扎切斷,同期切除右側(cè)腎臟。溫鹽水復(fù)溫,分層縫合 關(guān)腹,將大鼠置于加熱墊上復(fù)溫,蘇醒后喂5%葡萄糖生理鹽水,恢 復(fù)行走后放入鼠籠,正常喂養(yǎng),定時(shí)觀察,防止術(shù)后尿潴留等,術(shù)后 存活5d 以上表示模型成功。
關(guān)鍵字: 動物造模;
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