"SNU-398:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SRS-82細胞類似產品：：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞

PLA-801D細胞類似產品：：THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞

3T3-Swiss細胞類似產品：：SK Mel 24細胞、LIPF155C細胞、DMS-79細胞

C8161細胞類似產品：：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

SNU-398:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

Ramos (RA)細胞類似產品：：BALB/3T3 clone A31細胞、H19-7細胞、Nb-2細胞

A2780/CP70細胞類似產品：：A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞

HCC-9204細胞類似產品：：MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞

購買細胞注意事項：１)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完HAO，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系；２)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等；３)用７５%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次；４)建議客戶收到細胞后前３天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通交流?！炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代：１)提前將培養(yǎng)基、PBS放入３７℃水浴鍋內預熱，用７５%酒精擦拭后再放入超凈臺內；２)吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞；３)加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，３７℃孵育，每隔２~３min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用；４)用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產生大量的氣泡；５)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代：１)將細胞懸液轉移到無菌離心管內，１０００rpm離心５min；２)棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液；３)將細胞懸液分別接種到另外的２~３個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置３７℃溫箱培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

SNU-398:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

McCoy細胞類似產品：：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞

451Lu細胞類似產品：：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞

RASMC細胞類似產品：：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞

GM3190細胞類似產品：：RS4-11細胞、C17.2細胞、Hep 3B2.1-7細胞

HFTF細胞類似產品：：HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞

P3J HR-1細胞類似產品：：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞

OsACL細胞類似產品：：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞

OCM1細胞類似產品：：CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞

Duck embryo細胞類似產品：：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞

BIU-87/Adr細胞類似產品：：OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞

H4-II-E-C3細胞類似產品：：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞

786.O細胞類似產品：：NCIH2347細胞、Caov-3細胞、NCIH1838細胞

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SNU-398:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

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alpha TC1.6細胞類似產品：：HO1N1細胞、MIN-6細胞、BC-024細胞

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H-2009細胞類似產品：：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞

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NCIH378細胞類似產品：：COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞

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QGP-1細胞類似產品：：BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞

SMC-1細胞類似產品：：GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞

NCI-H128細胞類似產品：：UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞

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