"SNU-423:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)HAO與不HAO至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺HAO的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更HAO一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

BE2-C細胞類似產(chǎn)品：：HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞

HCC-1428細胞類似產(chǎn)品：：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞

HSC（Human Schwann）細胞類似產(chǎn)品：：CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞

MDA-MB-436細胞類似產(chǎn)品：：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

SNU-423:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

BEL7402細胞類似產(chǎn)品：：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞

DV-90細胞類似產(chǎn)品：：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞

A 549細胞類似產(chǎn)品：：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞

細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預熱；③超凈臺臺面應整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋HAO瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復吹打消化HAO的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋HAO瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

SNU-423:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復吹打。

MLMA細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞

H69細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞

SNB-19細胞類似產(chǎn)品：：LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞

NUGC-2細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞

RT4-D6P2T細胞類似產(chǎn)品：：Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞

SkChA1細胞類似產(chǎn)品：：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞

PC-3M-IE8細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞

HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞

CT-26 WT細胞類似產(chǎn)品：：Line 697細胞、CAL33細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞

HBSMC細胞類似產(chǎn)品：：Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞

H-146細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞

OCI/AML3細胞類似產(chǎn)品：：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞

TE-85 clone 5細胞類似產(chǎn)品：：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞

JROECL21細胞類似產(chǎn)品：：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞

Hs 578.T細胞類似產(chǎn)品：：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞

CT-26細胞類似產(chǎn)品：：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞

CT-26細胞類似產(chǎn)品：：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞

A72細胞類似產(chǎn)品：：JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞

Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞類似產(chǎn)品：：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞

OV1063細胞類似產(chǎn)品：：KYSE-30細胞、Colon38細胞、KMS-18細胞

WM115細胞類似產(chǎn)品：：NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞

HS578T細胞類似產(chǎn)品：：MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞

SV-HUC細胞類似產(chǎn)品：：AD-293細胞、231-luc細胞、NCM356細胞

T-ALL1細胞類似產(chǎn)品：：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞

SNU-423:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

Line 522細胞類似產(chǎn)品：：H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞

SW-1990細胞類似產(chǎn)品：：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞

KU19-19細胞類似產(chǎn)品：：LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞

NCIH740細胞類似產(chǎn)品：：95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞

MHCC97-H細胞類似產(chǎn)品：：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞

ONS-76細胞類似產(chǎn)品：：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞

HBE135-E6E7細胞類似產(chǎn)品：：WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞

NCM-460細胞類似產(chǎn)品：：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞

ML-2細胞類似產(chǎn)品：：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞

SK-N-F1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞

C-4 I細胞類似產(chǎn)品：：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞

SW-579細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞

Alexander細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞

MDA157細胞類似產(chǎn)品：：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞

HuO9細胞類似產(chǎn)品：：SW1990細胞、MDA-436細胞、BT.549細胞

Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞類似產(chǎn)品：：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞

MHCC 97-H細胞類似產(chǎn)品：：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞

WM115-mel細胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞

Rca-B細胞類似產(chǎn)品：：GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞

RT112細胞類似產(chǎn)品：：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞

Hs445細胞類似產(chǎn)品：：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞

FC33細胞類似產(chǎn)品：：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞

NCI-H1869細胞類似產(chǎn)品：：LS-1034細胞、ssMCF7細胞、TGHAVSMC細胞

NIH-OVCAR-3細胞類似產(chǎn)品：：251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞

HEK-AD 293細胞類似產(chǎn)品：：H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞

DMS114細胞類似產(chǎn)品：：LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞

HT-3細胞類似產(chǎn)品：：TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞

H1651細胞類似產(chǎn)品：：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞

Japanese Tissue Culture-39細胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞

NCI-H-82細胞類似產(chǎn)品：：BMDC細胞、HOS-TE85細胞、M619細胞

OKT 3細胞類似產(chǎn)品：：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞

CNLMG-B5537SKIN細胞類似產(chǎn)品：：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞

H-1341細胞類似產(chǎn)品：：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞

OAW 42細胞類似產(chǎn)品：：RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞

PANC0203細胞類似產(chǎn)品：：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞

NRK 49F細胞類似產(chǎn)品：：MCA205細胞、PC3-M細胞、C-28/I2細胞

LIM-1215細胞類似產(chǎn)品：：PANC0327細胞、H548細胞、OV433細胞

SNB-19細胞類似產(chǎn)品：：LP1細胞、C-643細胞、HMVEC細胞

CAL 39細胞類似產(chǎn)品：：MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞

RBL細胞類似產(chǎn)品：：MMAc.SF細胞、NK92MI細胞、H747細胞

JS1細胞類似產(chǎn)品：：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞

NTERA-2/D1細胞類似產(chǎn)品：：RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞

C-6細胞類似產(chǎn)品：：MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞

SkMel31細胞類似產(chǎn)品：：CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞

624 MEL細胞類似產(chǎn)品：：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞

Hx147細胞類似產(chǎn)品：：343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞

NCIH1155細胞類似產(chǎn)品：：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞

NCIH226細胞類似產(chǎn)品：：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞

IFRS1細胞類似產(chǎn)品：：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞

OVCAR-420細胞類似產(chǎn)品：：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞

MMQ細胞類似產(chǎn)品：：Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞

F9細胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞

HCC-1438細胞類似產(chǎn)品：：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞

NCI-H1944細胞類似產(chǎn)品：：RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞

H2030細胞類似產(chǎn)品：：Molm14細胞、CALU1細胞、L 1210細胞

OC-3-VGH細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞

HEK-A細胞類似產(chǎn)品：：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞

Hs 729T細胞類似產(chǎn)品：：MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞

COLO320/DM細胞類似產(chǎn)品：：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞

3T3-A31細胞類似產(chǎn)品：：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞

LS1034細胞類似產(chǎn)品：：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞

COLO-680N細胞類似產(chǎn)品：：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞

RPE-1細胞類似產(chǎn)品：：Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞

RTE細胞類似產(chǎn)品：：ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞

SL-1細胞類似產(chǎn)品：：C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞

MCF-7B細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞

P3 (Jiyoye)細胞類似產(chǎn)品：：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞

Sup T-1細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞

KYSE0410細胞類似產(chǎn)品：：H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞

HF-91細胞類似產(chǎn)品：：TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞

WPMY-1細胞類似產(chǎn)品：：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞

C-33-A細胞類似產(chǎn)品：：PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞

BSC40細胞類似產(chǎn)品：：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞

SKCO-1細胞類似產(chǎn)品：：FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞

H661細胞類似產(chǎn)品：：ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞

XWLC-05細胞類似產(chǎn)品：：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞

U-CH1細胞類似產(chǎn)品：：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞

D6P2T細胞類似產(chǎn)品：：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞

SKMEL2細胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞

MUTZ-1細胞類似產(chǎn)品：：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞

G422細胞類似產(chǎn)品：：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞

8402細胞類似產(chǎn)品：：VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞

SNU-423:人肝癌復蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

NS-1-Ag4-1細胞類似產(chǎn)品：：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞

KAT-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞

MV4II細胞類似產(chǎn)品：：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞

LA-795細胞類似產(chǎn)品：：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞

MDAMB453細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞

HUTU80細胞類似產(chǎn)品：：SK-LMS-1細胞、IPECJ2細胞、PCI-SG231細胞

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