PD-L1和PD-L2與PD-1結(jié)合,PD-1是T細(xì)胞上表達(dá)的一種受體,這種結(jié)合會(huì)負(fù)向調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。PD-1配體PD-L1和PD-L2存在于大多數(shù)癌細(xì)胞表面,它們與PD-1受體的相互作用會(huì)抑制T細(xì)胞活性,使癌細(xì)胞能夠逃避免疫監(jiān)視。該通路還參與調(diào)節(jié)自身免疫反應(yīng)。因此,這些蛋白(稱為免疫檢查點(diǎn))是許多類型癌癥以及多發(fā)性硬化癥、關(guān)節(jié)炎、狼瘡和1型糖尿病等疾病的有希望的治療靶點(diǎn)。檢查點(diǎn)抑制劑在多種癌癥類型中顯示出顯著的療效,并徹底改變了癌癥治療. PD-1抑制劑尼伏魯單抗、帕博利珠單抗、西米普利單抗以及PD-L1抑制劑阿特珠單抗、阿維魯單抗和度伐利尤單抗都是FDA批準(zhǔn)用于免疫治療的藥物.
PD-1/NFAT報(bào)告基因Jurkat重組細(xì)胞系是一種表達(dá)人PD-1(程序性細(xì)胞死亡1,也稱為PDCD1、SLEB2、CD279,GenBank登錄號(hào)#NM_005018)的Jurkat細(xì)胞系,其螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因受NFAT響應(yīng)元件調(diào)控,這些元件位于最小TATA啟動(dòng)子上游。因此,可以通過測(cè)量熒光素酶活性來監(jiān)測(cè)NFAT的激活.
PD-1的表達(dá)通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了驗(yàn)證,并且該細(xì)胞系在共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中通過抗PD-1和抗PD-L1中和抗體進(jìn)行了功能驗(yàn)證.
圖1:PD-1/NFAT報(bào)告基因Jurkat重組細(xì)胞系在共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中的作用機(jī)制示意圖。
PD-L1/TCR激活劑CHO細(xì)胞表面的TCR(T細(xì)胞受體)激活劑刺激Jurkat T細(xì)胞中的TCR,而CHO細(xì)胞系上過表達(dá)的PD-L1與Jurkat PD-1結(jié)合,阻斷了TCR激活信號(hào),阻止了NFAT的激活。向共培養(yǎng)中加入中和抗PD-1或抗PD-L1抗體,可以解除PD-L1/PD-1復(fù)合物,導(dǎo)致TCR激活和NFAT活性增加,進(jìn)而轉(zhuǎn)化為增加的熒光素酶報(bào)告信號(hào)。
PD-1/NFAT報(bào)告基因Jurkat重組細(xì)胞系已被引用25次。
僅限于研究用途。
艾美捷PD-1/NFAT報(bào)告基因-Jurkat重組細(xì)胞系:
貨號(hào):60535
同義詞:程序性細(xì)胞死亡1,PDCD1,PD-1,PD1,SLEB2,CD279,HPD-L,PD1/NFAT,PD-1 NFAT,PD-1/NFAT
宿主:細(xì)胞系Jurkat(克隆E6-1),人T淋巴母細(xì)胞,懸浮細(xì)胞
物種:人
提供方式:每瓶含有1 ml的細(xì)胞凍存培養(yǎng)基(BPS Bioscience,#79796)中超過1×10^6個(gè)細(xì)胞,UniProt #Q15116
支原體檢測(cè):該細(xì)胞系已進(jìn)行篩選,確認(rèn)無支原體屬物種.
儲(chǔ)存/穩(wěn)定性:細(xì)胞以干冰形式運(yùn)輸,收到后應(yīng)立即解凍或儲(chǔ)存在液氮中。不要使用-80°C冰箱進(jìn)行長期儲(chǔ)存.
培養(yǎng)基:強(qiáng)烈建議使用BPS Bioscience的這些經(jīng)過驗(yàn)證和優(yōu)化的培養(yǎng)基。其他制備或配方的培養(yǎng)基可能會(huì)導(dǎo)致次優(yōu)性能.
細(xì)胞培養(yǎng)所需培養(yǎng)基:
解凍培養(yǎng)基2(BPS Bioscience #60184):RPMI1640培養(yǎng)基(ATCC改良)添加10%胎牛血清、1%青霉素/鏈霉素
生長培養(yǎng)基2A(BPS Bioscience #60190):RPMI1640培養(yǎng)基(ATCC改良)添加10%胎牛血清、1%青霉素/鏈霉素,以及1 mg/ml的遺傳霉素和200 μg/ml的潮霉素B
功能性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基:
解凍培養(yǎng)基2(BPS Bioscience #60184):RPMI1640培養(yǎng)基(ATCC改良)添加10%胎牛血清、1%青霉素/鏈霉素
解凍培養(yǎng)基3(BPS Bioscience #60186):Ham’s F-12培養(yǎng)基添加10%胎牛血清、1%青霉素/鏈霉素
運(yùn)輸溫度:-80°C,避免反復(fù)凍融
科學(xué)類別:免疫治療
僅限研究使用
應(yīng)用:
在細(xì)胞模型中篩選PD-1或PD-L1信號(hào)通路的抑制劑.
表征PD-1的生物學(xué)活性及其與配體的相互作用.
文獻(xiàn)參考:
Sasca D, et al. 2019 Blood 133: 2305-2319
https://www.amyjet.com/products/BPS-60535.shtml