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武漢瀚海新酶生物科技有限公司

主營(yíng)產(chǎn)品:生物試劑、酶制試劑研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、技術(shù)咨詢及技術(shù)服務(wù);化工原料及產(chǎn)品(以上均不含危險(xiǎn)品)、體外診斷試劑、生物治療技術(shù)的研發(fā)

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高產(chǎn) RNA 合成試劑盒(≥2000nt)| High Yield RNA Synthesis Kit(≥2000nt)
發(fā)布日期:2023/1/18 10:50:18發(fā)布人:武漢瀚海新酶生物科技有限公司

產(chǎn)品概述:T7 RNA聚合酶是一種來(lái)源于T7噬菌體的一種依賴于DNA的RNA聚合酶,具有DNA聚合酶活性和較強(qiáng)的3´→5´核酸外切酶活性。T7 RNA聚合酶對(duì)T7啟動(dòng)子具有較高的特異性,能夠以T7啟動(dòng)子下游序列為模板合成大量的RNA。

運(yùn)輸與保存方法:≤0℃運(yùn)輸;-25~-15℃保存。

單位定義:在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系下,37℃1 h內(nèi)將1 nmol的ATP摻入酸性不溶物所需要的酶量定義為一個(gè)活性單位(U)。

質(zhì)量控制

核酸內(nèi)切酶殘留檢測(cè):50μL反應(yīng)體系中加入50 U本酶和1μgλDNA在37℃下孵育16 h,瓊脂糖凝膠電泳DNA譜帶不發(fā)生變化。

核酸外切酶殘留檢測(cè):50μL反應(yīng)體系中加入50 U本酶1μgλ-Hind III digestDNA在37℃下孵育16 h,瓊脂糖凝膠電泳DNA譜帶不發(fā)生變化。

RNase殘留檢測(cè):40μL反應(yīng)體系中加入40 U本酶和1μg MS2 RNA在37℃下孵育2 h,瓊脂糖凝膠電泳RNA譜帶不發(fā)生變化。

DNase殘留檢測(cè):40μL反應(yīng)體系中加入40 U本酶和4μg pUC19 DNA在37℃下孵育16 h,瓊脂糖凝膠電泳DNA譜帶不發(fā)生變化。

熱失活:75℃,20 min。

反應(yīng)終止:加入2μL 0.2 M EDTA(pH8.0 25℃)或者75°C加熱20 min。

DNA模板去除:可用DNase I(2U)37℃處理15 min。

反應(yīng)抑制劑:金屬離子螯合劑、NaCl和KCl,該酶對(duì)高濃度NaCl或KCl不耐受,當(dāng)其濃度超過150 mM時(shí),活性受到顯著抑制(活性約降低50%)。


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