Proteinase K（蛋白酶K）是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，其相對(duì)分子量約為29.3 kDa，可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K應(yīng)用廣泛，可用于制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實(shí)驗(yàn)，而變性劑如SDS（1%）可提高其活性，常用工作濃度為50-100 µg/mL，根據(jù)所用緩沖液是否含有SDS、尿素、pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。
產(chǎn)品性質(zhì)：
1）本品來(lái)源于基因重組酵母菌株；
2）純度（Native PAGE電泳檢測(cè)）：≥95%；
3）比活性值（Specific activity）：≥30 U/mg蛋白；
4）不含RNase和DNase；
5）在尿素和SDS中活性穩(wěn)定存在；
6）在較廣的pH范圍內(nèi)（pH 4.0 – 12.0）均有活性，pH范圍為pH 7.5 - 9.0；
7）反應(yīng)條件：反應(yīng)緩沖液中37℃ - 70℃溫育1 h。推薦反應(yīng)溫度選擇70℃；
8）活力單位定義：在37℃，pH 7.5的條件下，每分鐘釋放1 µM酪氨酸所需要的Proteinase K量定義為1個(gè)活性單位；
9）失活方法：反應(yīng)體系中加入PMSF或DFP抑制劑即可失活，65℃溫育10-15 min可部分失活。
運(yùn)輸和保存方法：
冰袋運(yùn)輸。4℃干燥保存，有效期3年。更長(zhǎng)期保存，可置于-20℃冷凍保存。
使用方法
1. 20-40 mg/mL Proteinase K儲(chǔ)存液的配制
1）將干粉溶解于稀釋緩沖液中，配制成40-80 mg/mL原液；
【注】：稀釋緩沖液配方：20 mM Tris-HCl (pH 7.4), 1 mM CaCl2。
2）使用低蛋白吸附的0.22 µm濾器過(guò)濾除菌；
3）加入等體積無(wú)菌甘油，配制成含50%甘油的Proteinase K儲(chǔ)存液。
【注】：Proteinase K儲(chǔ)存液4℃保存1年。若需反復(fù)使用，需分裝保存。
- 按照核酸提取說(shuō)明書添加指定量Proteinase K儲(chǔ)存液即可。
注意事項(xiàng)：
1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2）啟用后如需反復(fù)使用，需置于-20℃～-80℃冰箱冷凍或者配制成溶液后過(guò)濾除菌分裝保存。
3）本產(chǎn)品僅作科研用途！
素材來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)
想了解更多生化試劑知識(shí)，敬請(qǐng)關(guān)注“匯百試劑”官方網(wǎng)站：
http://www.hnhbsj.com
(本網(wǎng)站所有內(nèi)容，凡注明來(lái)源為“匯百試劑”，版權(quán)均歸匯百試劑所有，未經(jīng)授權(quán)，任何媒體、網(wǎng)站或個(gè)人不得轉(zhuǎn)載，否則將追究法律責(zé)任，授權(quán)轉(zhuǎn)載時(shí)須注明“來(lái)源：匯百試劑”。本網(wǎng)注明來(lái)源為其他媒體的內(nèi)容為轉(zhuǎn)載，轉(zhuǎn)載僅作觀點(diǎn)分享，版權(quán)歸原作者所有，如有侵犯版權(quán)，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我們。)