在我們使用多肽的過程中，我們經(jīng)常會遇到多肽純度和多肽含量這兩個(gè)指標(biāo)，而很多小伙伴可能會有這樣的疑問，為什么我們的多肽純度是95%，但是肽含量卻只有80%呢？因?yàn)?，這個(gè)是兩個(gè)完全不同的概念。
多肽純度：多肽的純度是指使用HPLC分析法在214nm(214nm是肽鏈的吸收波長)處檢測到的目標(biāo)多肽的含量；
多肽含量：是指樣品中肽類物質(zhì)相對于非肽類物質(zhì)所占的百分比；
多肽的純度是指使用HPLC分析法在214nm(214nm是肽鏈的吸收波長)處檢測到的目標(biāo)多肽的含量；除了目標(biāo)多肽外，HPLC還可以檢測到的雜質(zhì)包括：缺失序列（缺失了一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的靶序列），截?cái)嘈蛄校颖Ｗo(hù)過程中產(chǎn)生的序列）以及脫保護(hù)不完全序列（產(chǎn)生于整個(gè)合成過程或最后的裂解過程）等；但是，HPLC檢測不到水和殘留的鹽份如三氟乙酸鹽，醋酸鹽等，而在多肽合成過程中，多肽是通過三氟乙酸將肽序從樹脂上切割下來的，而且在純化過程中也會產(chǎn)生少量的TFA，因此，多肽游離的氨基末端和其他側(cè)鏈如Arg、Lys、His都可生成少量TFA雜質(zhì)；還有一個(gè)就是水分，多肽通常采用凍干法脫水，即使如此，水也會因共價(jià)結(jié)合的能力不同而不同程度地存在著，因此，通常交付的多肽中，通常都含有TFA鹽和微量的水分，而這些都是HPLC檢測不出來的，因此，導(dǎo)致了肽含量和肽純度的不同。
我們知道，多肽純度是用HPLC分析法檢測得到的，那么肽含量又是如何檢測的呢？通常，肽含量通過氨基酸組分分析或紫外分光法測定的。這個(gè)信息主要是在一些對肽的濃度很敏感的實(shí)驗(yàn)中，對計(jì)算肽的濃度是很重要的。