2024年5月，上海泰坦科技股份有限公司（以下簡稱“泰坦科技”）正式成為瑞普利金（上海）生物科技有限公司（以下簡稱“瑞普利金”）透析薄膜業(yè)務(wù)在全國科研領(lǐng)域總經(jīng)銷。
作為實(shí)驗(yàn)室透析產(chǎn)品的開創(chuàng)者和技術(shù)領(lǐng)導(dǎo)者，瑞普利金提供多樣的透析膜選擇，以滿足實(shí)驗(yàn)室研究者不斷變化的需求。如何選擇透析膜？請(qǐng)查收這份指南！
透析原理
透析是指溶質(zhì)在濃度梯度的驅(qū)使下，通過半透膜選擇性擴(kuò)散，從而達(dá)到大/小分子分離，膜兩側(cè)濃度平衡。如果將樣品置于透析膜管內(nèi)，通過置換膜管外部的透析緩沖液，可將小顆粒物質(zhì)清除，從而達(dá)到純化大分子物質(zhì)的目的。一般來說，一天之內(nèi)置換3~5次緩沖液，然后在室溫條件下，放在攪拌臺(tái)上隔夜透析，即可達(dá)到高效的透析結(jié)果。
標(biāo)準(zhǔn)的透析操作一般需要16~24小時(shí)。許多因素會(huì)影響透析效率，包括擴(kuò)散系數(shù)、pH值、溫度、時(shí)間、物質(zhì)濃度、樣品體積、透析緩沖液體積、透析緩沖液的置換次數(shù)、膜表面積、膜厚度、分子帶電荷及緩沖液攪拌速率。
選擇“正確的膜”
透析成功進(jìn)行的關(guān)鍵是在適當(dāng)?shù)臈l件下選用最合適的膜，可根據(jù)以下6個(gè)步驟進(jìn)行選擇：
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根據(jù)應(yīng)用需求，選擇透析膜級(jí)別：生物技術(shù)級(jí)或標(biāo)準(zhǔn)級(jí)。
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根據(jù)溶液化學(xué)性質(zhì)，選擇透析膜類型：纖維素酯（CE）或再生纖維素（RC）。
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根據(jù)應(yīng)用需求，選擇合適的透析膜結(jié)構(gòu)：卷式（管狀）膜、一次性即用型透析裝置或圓形、方形平面膜。
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根據(jù)溶質(zhì)分子量，選擇合適的膜截留分子量（MWCO）。
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根據(jù)透析液處理量選擇：卷式（管狀）膜選擇扁平寬度；即用型透析裝置選擇容量。
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根據(jù)應(yīng)用需求，選擇合適的膜處理方式：干式、濕式。
標(biāo)準(zhǔn)級(jí)與生物技術(shù)級(jí)對(duì)比
透析袋寬度選擇
透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快，較大的透析管因擴(kuò)散距離較長透析較慢。簡單來說，透析的樣品越多，需要選擇的透析袋寬度越大，反之亦然。透析袋直徑和寬度的關(guān)系可參考下圖：
透析袋分子量選擇
透析膜微觀下呈海綿狀結(jié)構(gòu)，代表膜孔徑的截留分子量（MWCO）是一個(gè)間接衡量膜分離性能的參數(shù)。更準(zhǔn)確的說，膜的截留分子量可定義為截留率至為少95%的溶質(zhì)的分子量。
由于溶質(zhì)的滲透特性取決于分子形狀、水合化程度、離子電荷和極性，我們建議選擇透析袋分子量是被截留物質(zhì)的分子量的一半以下，或是將要透出的物質(zhì)的最大分子量的兩倍以上。
透析液選擇
生物分子需在適當(dāng)?shù)膒H范圍內(nèi)保存。一般的透析緩沖液pH范圍為6~8。以下為常用的緩沖液：水、PBS、TBS、HEPES、氨基酸緩沖液。
透析緩沖液的體積越大，小分子擴(kuò)散的驅(qū)動(dòng)力越大。我們一般推薦緩沖液和樣品的體積比為100：1。當(dāng)擴(kuò)散速率降低，膜兩側(cè)溶液趨于平衡時(shí)，通過置換緩沖液，可維持小分子擴(kuò)散驅(qū)動(dòng)力和透析速率
一般推薦在12~24小時(shí)內(nèi)，置換緩沖液2到3次，每次緩沖液置換，可將溶質(zhì)濃度降低十分之一具體安排如下：
對(duì)于鹽濃度較高的樣品，推薦使用低鹽濃度的緩沖液。不推薦直接使用純水作為緩沖液，因?yàn)闈B透壓力可能將水引入膜管，使樣品體積膨脹并可能導(dǎo)致膜管破裂。使用一系列濃度逐漸降低的溶液作為緩沖液可防止?jié)B透壓力導(dǎo)致的膜管膨脹。
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