本周為大家?guī)淼奈墨I(xiàn)為發(fā)表于Int Immunopharmacol. (IF: 5.6)的”Brain-derived extracellular vesicles mediate systemic coagulopathy and inflammation after traumatic brain injury”。本文使用了LabEx提供的Luminex檢測服務(wù)。
創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)是導(dǎo)致全球死亡和殘疾的主要原因之一。創(chuàng)傷性腦損傷引發(fā)的全身性炎癥和凝血最終會導(dǎo)致全身性影響,從而導(dǎo)致預(yù)后不良。然而,造成創(chuàng)傷性腦損傷后全身凝血病變和炎癥的機(jī)制仍不清楚。
在之前的研究中,研究者發(fā)現(xiàn)源于損傷大腦的腦源性細(xì)胞外囊泡(BDEVs)可激活凝血級聯(lián)和炎癥細(xì)胞。這項研究主要研究了腦源性細(xì)胞外囊泡如何影響外周循環(huán)中的全身凝血病變和炎癥。細(xì)胞因子和凝血功能的檢測結(jié)果表明,BDEVs可在24小時內(nèi)通過影響炎癥因子和趨化因子導(dǎo)致全身性凝血病變和炎癥。此外,根據(jù)流式細(xì)胞儀和血細(xì)胞計數(shù)器的檢測結(jié)果,我們發(fā)現(xiàn)BDEVs可引起血細(xì)胞計數(shù)的變化,如血小板和白細(xì)胞數(shù)量減少,中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、活化血小板、循環(huán)血小板-EVs和白細(xì)胞衍生EVs的百分比增加。此外,用乳粘菌素消除循環(huán)中的BDEVs有助于改善凝血病和炎癥,緩解血細(xì)胞功能障礙,并減少循環(huán)中的血小板-EVs和白細(xì)胞衍生EVs。我們的研究為創(chuàng)傷性腦損傷相關(guān)的繼發(fā)性損傷提供了一個新的視角和潛在機(jī)制。
LabEx提供的Luminex檢測服務(wù):
Luminex多重細(xì)胞因子陣列(BIO-RAD,LXLBM31-1)用于檢測血漿中的炎癥細(xì)胞因子,由LabEx根據(jù)制造商的協(xié)議(Luminex,Austin,TX,USA)使用Luminex進(jìn)行。
為了研究BDEVs在創(chuàng)傷性腦損傷相關(guān)炎癥中的作用,我們向受傷小鼠注射了 BDEVs,并進(jìn)行了基于Luminex的細(xì)胞因子檢測,以測定 3、24 和 72 h血漿中炎癥因子和趨化因子的濃度。TBI組和 BDEVs 組的結(jié)果顯示,白細(xì)胞介素如 IL-1β、IL-4、IL-2、IL-6、IL-10、IL-16、TNF-α、IFN-γ 和 GM-CSF(圖A-B 和圖D)以及趨化因子如 IFN-γ 和 GM-CSF (圖 2A-B)。與假小鼠相比,血漿中的趨化因子如 CXCL5、CXCL11、CXCL12、CXCL17、CXCL10、CCL1、CCL2、CCL3、CCL5、CCL12 和 CCL17(圖B-C和圖D)升高。
BDEV可誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)和凝血病
重要發(fā)現(xiàn):
- 腦源性 EV 在腦外傷后誘發(fā)炎癥和凝血病變。
- 腦源性 EV 可誘導(dǎo)白細(xì)胞和血小板功能障礙。
- 腦源性 EV 可激活并刺激白細(xì)胞和血小板釋放 EV。
- 清除腦源性 EV 可減輕全身凝血病變和炎癥。
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基因水平:PCR Array、RT-PCR、PCR、單細(xì)胞測序
蛋白水平:MSD、Luminex、CBA、Elispot、Antibody Array、ELISA、Sengenics
細(xì)胞水平:細(xì)胞染色、細(xì)胞分選、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞功能
組織水平:空間多組學(xué)、多重?zé)晒饷庖呓M化、免疫組化、免疫熒光
數(shù)據(jù)分析:流式數(shù)據(jù)分析、組化數(shù)據(jù)分析、多因子數(shù)據(jù)分析
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