"HLF-a細(xì)胞：人肺細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無(wú)菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過(guò)濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過(guò)程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過(guò)小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開(kāi)始貼附在瓶壁上。
Hs 600.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
Pt K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞、KM12細(xì)胞
RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞
B-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細(xì)胞、SaOS細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞
alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞
PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞
HEK-293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞
HCC2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞
CAL85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細(xì)胞、GM03569D細(xì)胞、SGC-7901/DDP細(xì)胞
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞
Gerner 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞
GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
MCF-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、GRSL細(xì)胞
HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞
H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
GM03671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細(xì)胞、NCI-H295R細(xì)胞、E304細(xì)胞
MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
D-341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT2細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞
HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
P31-FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：801-D細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞、SL-29細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細(xì)胞、HT-22細(xì)胞、293FT細(xì)胞
CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞
NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞
HuT-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞
H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma細(xì)胞：細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
SF-539 BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞、RMC細(xì)胞
SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
GA-10(Clone 4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERTHME1細(xì)胞、UCH1細(xì)胞、MKN-45細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞、NCI-747細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
SaOS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞
PTK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC154細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞
OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞
Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞
SW982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞
Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞
WERI-Rb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞
MDA-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞、LLC細(xì)胞
NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞
CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、He-La細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、KP-4細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞
CCD 19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1618細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、ZR751細(xì)胞
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