"HLF-a Cell:人肺細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
Jeko1細胞系相關產品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
GM00215A細胞系相關產品:HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
SKMES1細胞系相關產品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
NCI-H711細胞系相關產品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HLF-a Cell:人肺細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結:懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCT-FET細胞系相關產品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
TE-4細胞系相關產品:GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
NHRF細胞系相關產品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
NCI-H498細胞系相關產品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關產品:H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HLF-a Cell:人肺細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞
CATH-a細胞系相關產品:M210B4細胞、HCFB(HCF)細胞、Hs-688A-T細胞
NBL-7細胞系相關產品:KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞
Mono-Mac-1細胞系相關產品:ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
MDAMB231細胞系相關產品:MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞
SK MEL-28細胞系相關產品:Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
SW-948細胞系相關產品:SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
SNU-475細胞系相關產品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
HLF-a Cell:人肺細胞系
253J-Bladder-V細胞系相關產品:LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞
A72細胞系相關產品:JROECL19細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞、PF382細胞
UWB1.289+BRCA1細胞系相關產品:Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞
Hs 832(C).T細胞系相關產品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
AN3細胞系相關產品:Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
A-10細胞系相關產品:Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞
CD 18細胞系相關產品:KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
ZR75-1細胞系相關產品:MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
OVCAR3細胞系相關產品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
OVCAR3細胞系相關產品:BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
SK-ES1細胞系相關產品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
SK-RC 52細胞系相關產品:BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞
H2228細胞系相關產品:Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞
SW-1271細胞系相關產品:HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
IEC-18細胞系相關產品:McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
SC1細胞系相關產品:H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
HCC-202細胞系相關產品:RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞
ME1細胞系相關產品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
SK-RC 42細胞系相關產品:SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
G422細胞系相關產品:SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
AML-EOL-1細胞系相關產品:HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
RGC-5細胞系相關產品:B16F0細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞、A 72細胞
MNNG-HOS細胞系相關產品:OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
OE21細胞系相關產品:NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關產品:LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
A2008細胞系相關產品:OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
NCI-H711細胞系相關產品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
Capan 1細胞系相關產品:CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
H1437細胞系相關產品:C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
MHCC 97-L細胞系相關產品:CT-26 WT細胞、U-2OS細胞、Colon38細胞
Duck embryo細胞系相關產品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞
HTR8細胞系相關產品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關產品:NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
BetaTC6細胞系相關產品:NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
GM00637F細胞系相關產品:TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞
Hs 578.T細胞系相關產品:OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關產品:NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
HT-1080細胞系相關產品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
PC-3M-2B4細胞系相關產品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
Anip973細胞系相關產品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
NCI-H211細胞系相關產品:H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
ECV-304細胞系相關產品:National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
KYSE140細胞系相關產品:H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞
HLF-a Cell:人肺細胞系
BEL/FU細胞系相關產品:KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
BT325細胞系相關產品:QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞
TE14細胞系相關產品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
Colo-678細胞系相關產品:SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞
P3J-HR-1細胞系相關產品:HFF1細胞、HIEC6細胞、MCF7-GFP細胞
T-24細胞系相關產品:SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
Mc Coy細胞系相關產品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
HNTEC細胞系相關產品:MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
COLO680N細胞系相關產品:CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
MDA-MB-157細胞系相關產品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
COV-434細胞系相關產品:HT-1376細胞、SW 1222細胞、EC-9706細胞
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關鍵字: HLF-a Cell:人肺細胞系
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