IMDM(含雙抗)
中文名稱 | IMDM(含雙抗) |
---|---|
中文同義詞 | IMDM(含雙抗) |
英文名稱 | IMDM (including double antibody) |
英文同義詞 | IMDM (including double antibody) |
CAS號(hào) | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號(hào) | |
相關(guān)類別 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
Mol文件 | Mol File |
結(jié)構(gòu)式 |
IMDM(含雙抗) 性質(zhì)
IMDM(含雙抗)是含有青霉素-鏈霉素混合液的IMDM培養(yǎng)基。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染最常用的抗生素,其中,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對(duì)革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對(duì)革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。
IMDM(含雙抗)含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等多種成分,但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子,故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。
IMDM(Iscove’s Modified Dulbecco Medium)即Iscove改良的DMEM培養(yǎng)基,是Guilber 和Iscove在1976年設(shè)計(jì)的,用以培養(yǎng)紅細(xì)胞前體細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。IMDM培養(yǎng)基在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了硒、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素,并用硝酸鉀代替了硝酸鐵,營養(yǎng)非常豐富,非常適合于快速增殖,高密度細(xì)胞培養(yǎng)。IMDM培養(yǎng)基在DMEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加了硒、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素,并用硝酸鉀代替了硝酸鐵,營養(yǎng)非常豐富,非常適合于快速增殖,高密度細(xì)胞培養(yǎng)。IMDM培養(yǎng)基不僅可以培養(yǎng)有特殊營養(yǎng)要求的細(xì)胞(如小鼠B淋巴細(xì)胞,LPS刺激的B細(xì)胞,骨髓造血細(xì)胞,T淋巴細(xì)胞以及各種雜交瘤細(xì)胞),還可以作為一些獨(dú)特的無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)液。(一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用IMDM(含雙抗)紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到徹底滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。