背景及概述[1]
BCA蛋白濃度檢測(cè)是一個(gè)實(shí)驗(yàn),是根據(jù)吸光值可以推算出蛋白濃度.堿性條件下,蛋白將Cu2+還原為Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物,兩分子BCA螯合一個(gè)Cu+。將該水溶性復(fù)合物在562nm處的吸收值,與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,即可計(jì)算待測(cè)蛋白的濃度。
BCA蛋白分析試劑A可以用于研究蛋白:蛋白間相互作用,衡量親和層析后的組分含量,估算從細(xì)胞裂解液里提取的膜蛋白含量和高通量篩選融合蛋白。
BCA蛋白分析試劑A品特點(diǎn):1)比色法;在562納米讀數(shù)與多數(shù)離子和非離子型去污劑兼容,比經(jīng)典的Lowry方法快4倍,同時(shí)操作更加簡(jiǎn)單;2)所有試劑在室溫下穩(wěn)定2年,工作液可穩(wěn)定存放24小時(shí);3)BSA的線性范圍為20-2,000微克/毫升,改良的操作最小可以檢測(cè)到5微克/毫升;4)方便的微孔板和比色杯形式蛋白:蛋白差異比染料結(jié)合法小。
與其他任何與洗滌劑相容的蛋白質(zhì)分析相比,BCA蛋白分析試劑A可用于更多實(shí)驗(yàn)室,可在蛋白質(zhì)研究中使用大多數(shù)樣品類型準(zhǔn)確測(cè)定蛋白質(zhì)濃度。BCA蛋白分析試劑A可用于評(píng)估全細(xì)胞裂解物和親和柱部分的產(chǎn)量,以及監(jiān)測(cè)工業(yè)應(yīng)用中的蛋白質(zhì)污染。
與大多數(shù)染料結(jié)合方法相比,BCA測(cè)定受蛋白質(zhì)組成差異的影響更小,從而提供更高的蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的均一性。BCA蛋白分析試劑A可應(yīng)用于研究蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)相互作用、親和層析后測(cè)量柱級(jí)分、估計(jì)細(xì)胞提取物中膜蛋白的回收百分比及高通量篩選融合蛋白。
主要參考資料
[1] 蛋白質(zhì)純化與分析技術(shù)