花氰染料Cy5是一種常見的熒光染料，其分子含有強吸收的氰基和高效發(fā)光熒光團，使其在近紅外波段（約640-670 nm）具有顯著的光吸收和熒光發(fā)射?；ㄇ枞玖螩y5的最大吸收波長一般在650納米左右，而發(fā)射波長在670納米左右，它的熒光量子產(chǎn)率和穩(wěn)定性都很好?；ㄇ枞玖螩y5在水中具有良好的溶解度和對pH變化的一定耐受性，這使得它在生物標(biāo)志物和成像等領(lǐng)域具有廣泛的潛在應(yīng)用。該物質(zhì)由于發(fā)射在近紅外范圍內(nèi)，可以有效降低自身熒光的干擾，提高成像的對比度和靈敏度，適用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷。

圖1 花氰染料Cy5的性狀圖

基本介紹

CY 為花菁 (Cyanine) 的縮寫，是由奇數(shù)個甲基單位連接的兩個氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長長、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高、水溶性好、合成相對簡單等特點。CY 系類染料例如花氰染料Cy5常被用于蛋白，抗體以及小分子化合物的標(biāo)記，對于蛋白抗體的標(biāo)記，可以通過簡單的混合反應(yīng)來完成結(jié)合。

制備方法

首先，將5克對羥基苯甲酸（3-羥基苯甲酸）和10克氯化亞硫酸鹽（SOCl?）在室溫下與二氯甲烷（DCM）混合4小時，將對羥基苯甲酸轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的氰化物。接下來，將得到的氰基化合物與5g氫化鋁鋰（LiAlH?）在無水醚（或四氫呋喃，THF）中在0-5℃的溫度下反應(yīng)2小時，形成氨基化合物。將氨基化合物與5 g對硝基苯甲酸和2 ml濃硫酸混合，加熱至70℃，加熱4小時，促進縮合反應(yīng)，形成該物質(zhì)的核心結(jié)構(gòu)。反應(yīng)完成后，將混合物冷卻并用冷水洗滌以除去未反應(yīng)的原料和副產(chǎn)物。然后，用適量的乙醇再結(jié)晶純化。最后將純化后的花氰染料Cy5在真空干燥箱中干燥至完全干燥，得到高純度的花氰染料Cy5。[1]

化學(xué)應(yīng)用

真菌毒素是真菌在食品或飼料里生長所產(chǎn)生的一類有毒的次級代謝產(chǎn)物,能夠?qū)κ称吩斐蓢?yán)重的污染,現(xiàn)在已經(jīng)成為了威脅全球食品安全的主要因素之一。有研究報道花氰染料Cy5可用于標(biāo)記核酸適配體，被標(biāo)記的核酸適配體可高效地實現(xiàn)甲胎蛋白核酸適配體的激光誘導(dǎo)熒光分析，在生物化學(xué)研究領(lǐng)域中有較好的應(yīng)用。[2]

參考文獻

[1] 賈春輝. 水溶性不對稱吲哚菁染料的合成、光學(xué)性能及生物標(biāo)示[D].河南大學(xué).

[2] 王晨楓等. 甲胎蛋白核酸適配體的毛細管電泳激光誘導(dǎo)熒光分析[C],中國化學(xué)會, 2017.