背景^[1-3]

SM緩沖液，也稱為Tris-SM緩沖液或SM液，是一種在科研領(lǐng)域中廣泛使用的緩沖溶液。M緩沖液是一種在分子生物學(xué)實驗中常用的無菌溶液，主要用于稀釋和保存λ噬菌體原種。它由硫酸鎂、氯化鈉、明膠等成分組成，并且經(jīng)過高壓滅菌處理。SM緩沖液的一個重要特點是含有明膠，這有助于在儲存過程中穩(wěn)定λ噬菌體顆粒。

SM緩沖液

一、組成成分

SM緩沖液主要由以下成分組成：

氯化鈉（NaCl）：提供必要的離子強度，維持溶液的滲透壓。

TRIS（三羥甲基氨基甲烷）：作為緩沖劑，調(diào)節(jié)溶液的pH值，使其保持穩(wěn)定。

硫酸鎂（MgSO4）：為溶液提供鎂離子，對某些生物過程有重要影響。

明膠：作為穩(wěn)定劑，有助于保持溶液的穩(wěn)定性和粘稠度。

二、制備與滅菌

SM緩沖液在制備后，需要經(jīng)過高壓滅菌處理，以確保其無菌狀態(tài)。這一步驟對于后續(xù)的科研實驗至關(guān)重要，可以避免因微生物污染而導(dǎo)致的實驗誤差或失敗。

三、主要用途

SM緩沖液的主要用途包括：

λ噬菌體原種的保存和稀釋：λ噬菌體是最早使用的克隆載體之一，其基因組是長度約為50kb的雙鏈DNA分子。SM緩沖液能夠有效地保存和稀釋λ噬菌體原種，保持其活性和穩(wěn)定性。

科研實驗：除了用于λ噬菌體的保存和稀釋外，SM緩沖液還可能在其他科研實驗中發(fā)揮重要作用，具體取決于實驗的具體需求和設(shè)計。

四、使用注意事項

無菌操作：在使用SM緩沖液時，應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，以避免微生物污染。

儲存條件：SM緩沖液應(yīng)儲存在適當(dāng)?shù)臏囟认?，通常建議常溫儲存。但請注意，由于SM緩沖液中含有明膠成分，在低溫下可能會形成膠凍狀。如果發(fā)生這種情況，可以在25-37℃下孵育直至完全溶解后再使用。

實驗要求：根據(jù)實驗的具體要求操作SM緩沖液，確保其發(fā)揮最佳效果。

五、價格與市場

SM緩沖液的價格因品牌、規(guī)格和銷售渠道等因素而異。一般來說，100ml裝的SM緩沖液價格在100元左右，而500ml裝的價格則可能達(dá)到228元左右。具體價格請參考各品牌官網(wǎng)或相關(guān)銷售平臺。

應(yīng)用^[4][5]

SM緩沖液可以用于青枯菌專性噬菌體的篩選及其防控番茄土傳青枯病的效果研究

以番茄青枯?。ㄖ虏【鸀镽alstoniasolanacearum,以下簡稱青枯菌）為研究對象,從我國江蘇、浙江、江西和廣西4省青枯病發(fā)病嚴(yán)重田塊的番茄根際土壤中分離出4株青枯菌專性噬菌體,并分別命名為NJ-P3、NB-P21、NC-P34和NN-P42。通過觀察4株噬菌體的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分析鑒定4株噬菌體的基因組信息及其進化淵源以及探討4株噬菌體的室內(nèi)生物學(xué)特性等,明確了4株噬菌體的分類地位和特性;通過研究噬菌體的最佳保存條件以及在溫室和大田條件下防控番茄青枯病的效果,初步建立了青枯菌專性噬菌體應(yīng)用的技術(shù)體系。

具體研究結(jié)果如下:1.4株噬菌體在青枯菌平板上均可形成圓形噬菌斑,且噬菌斑清晰透明,直徑約為1～2 mm;通過透射電鏡觀察到4株噬菌體頭部均呈正六面體結(jié)構(gòu),屬于尾噬菌體目,短尾噬菌體科。2.基于Illumina Hiseq測序平臺,對4株噬菌體進行全基因組測序分析發(fā)現(xiàn),噬菌體NJ-P3、NB-P21、NC-P34和NN-P42基因組長分別為42528 bp、41194bp、41943 bp和42278 bp,G+C含量分別為62.26%、62.22%、61.99%和62.10%。4株噬菌體基因組相似度較高,部分區(qū)域出現(xiàn)重排現(xiàn)象,均與短尾青枯菌噬菌體DURPⅡ親緣關(guān)系最近。4株噬菌體分別約有50個蛋白,共享有48個同源蛋白,同源蛋白約占各噬菌體總蛋白的96%,表明4株噬菌體之間具有較高的同源性。3.生物學(xué)特性研究發(fā)現(xiàn),4株噬菌體對不同寄主來源的青枯菌均有較強的裂解活性但均不能裂解大腸桿菌和假單胞菌。4株噬菌體滴度均在1.5 X 1011～8.5 X 1011 PFU/mL之間;最佳感染復(fù)數(shù)均在0.01～0.1之間;感染青枯菌的潛伏時間均為30 min,裂解時間均為90min,NJ-P3的裂解量最小,約為254;4株噬菌體熱穩(wěn)定性均較好,在20～40℃范圍內(nèi)處理24h時,裂解效果最好,但當(dāng)處理溫度高于60℃時,裂解活性均喪失;4株噬菌體在pH為4～10的范圍內(nèi)均有裂解活性,在pH為6～7時裂解活性最高;4株噬菌體均可以耐受紫外線80 min的照射,當(dāng)照射時間超過90 min時,裂解活性喪失。4.考慮到長途運輸?shù)谋憬菪?對其最佳儲存條件進行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)4株噬菌體均可以置于常溫下保存（25℃）,且具有較好的裂解效果。通過對比4株噬菌體在不同溶劑處理下的滴度和侵染活性的變化,可以看出噬菌體NJ-P3和噬菌體NB-P21保存于無菌水中活性最高,噬菌體NC-P34保存于SM緩沖液中活性最高,噬菌體NN-P42保存于30%甘油中活性最高。

參考文獻

[1]Parasites and competitors suppress bacterial pathogen synergistically due to evolutionary trade‐offs[J].Xiaofang Wang;;Zhong Wei;;Mei Li;;Xueqi Wang;;Anqi Shan;;Xinlan Mei;;Alexandre Jousset;;Qirong Shen;;Yangchun Xu;;Ville‐Petri Friman.Evolution,2017(3)

[2]Phage–bacteria interaction network in human oral microbiome[J].Jinfeng Wang;;Yuan Gao;;Fangqing Zhao.Environmental Microbiology,2016(7)

[3]Silk route to the acceptance and re‐implementation of bacteriophage therapy[J]..Biotechnology Journal,2016(5)

[4]Genomic diversity of large-plaque-forming podoviruses infecting the phytopathogen Ralstonia solanacearum[J].Takeru Kawasaki;;Erlia Narulita;;Minaho Matsunami;;Hiroki Ishikawa;;Mio Shimizu;;Makoto Fujie;;Anjana Bhunchoth;;Namthip Phironrit;;Orawan Chatchawankanphanich;;Takashi Yamada.Virology,2016

[5]侯玉剛.青枯菌專性噬菌體的篩選及其防控番茄土傳青枯病的效果研究[D].南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2018.