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5-羥基色胺的檢測方法

2023/12/13 9:20:48

簡介

5-羥基色胺(5-HT)又叫血清素(serotonin)?是一種雜環(huán)胺,分子式為C10H12N2O(分子量為176?2)?由Ersparmer和Vialli在1937年首次分離。5-羥基色胺廣泛存在于自然界動植物中。水果、蔬菜、堅果等都含有5-羥基色胺無脊椎動物和脊椎動物組織中也發(fā)現(xiàn)了。哺乳動物除骨骼肌、外周神經(jīng)和腎上腺不含外,幾乎遍布其他器官組織。人體內(nèi)5-羥基色胺主要存在于胃腸道粘膜的嗜鉻細(xì)胞?約占總量的80%?其余的主要分布在血小板[1]。

圖1 5-羥基色胺的性狀

圖1 5-羥基色胺的性狀

檢測方法

5-羥基色胺的測定方法有熒光測定法、薄層層析法、放射免疫法(radioimmunoassay?RIA)、放射酶法、氣相色譜法(gas chromatography?GC)、氣相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)法(gas chromatography-mass spectro-graphy?GC-MS)、高效液相色譜法(high pressureliquid chromatography?HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)法(LC-MS)等。高效液相色譜法由于其高靈敏度、高特異性、樣品用量小、干擾因素少、可同時測定5-羥基色胺及其相關(guān)吲哚物等特點(diǎn)受到研究人員的青睞。目前國內(nèi)外5-羥基色胺、5-HIAA的研究普遍應(yīng)用HPLC。對于熒光光度法而言,5-羥基色胺與鄰苯二甲醛(OPT)在強(qiáng)酸條件下加熱反應(yīng)生成熒光復(fù)合物熒光光度計檢測。本法操作繁瑣、靈敏度低、特異性差、但儀器要求稍低。而對于HPLC而言,HPLC測5-羥基色胺有紫外法、熒光法和電化學(xué)法用得較多的是熒光法和電化學(xué)法。因?yàn)榱u吲哚類物質(zhì)在300 nm左右有最大吸收波長?340 nm左右有最大發(fā)射波長。利用5-羥基色胺的自然熒光檢測早有報道。該法較電化學(xué)法簡便?技術(shù)要求低,可同時檢測5-HT、5-HIAA、5-HTP、Trp等物質(zhì)。pH值對熒光有影響,受影響最大的是5-HIAA。該物質(zhì)在pH為7時發(fā)射波長為330 nm。在強(qiáng)酸條件下發(fā)射波長為550 nm,而激發(fā)波長并無變化。pH對5-羥基色胺的影響較小[2]。

參考文獻(xiàn)

[1]李俊德,劉少華,唐蜜. 5-羥基色氨酸研究進(jìn)展 [J]. 精細(xì)與專用化學(xué)品, 2014, 22 (11): 36-39. DOI:10.19482/j.cn11-3237.2014.11.010

[2]王強(qiáng). 5-羥色胺的檢測及臨床意義 [J]. 國外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊, 2004, (02): 149-151.

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