霍亂弧菌是霍亂的病原體,霍亂是一種潛在的致命腸道細菌感染?;魜y毒素是由霍亂弧菌分泌的一種蛋白質(zhì)復合物,是霍亂弧菌引起嚴重疾病所必需的。霍亂毒素還被認為可以促進病菌的傳播,因為受感染的人會排出許多升的腹瀉液,這些腹瀉液通常每升含有超過1011種病菌。
霍亂毒素由(Cholera toxin,CT)兩個亞單位組成,即A亞單位(CTA)和B亞單位(CTB)。A亞單位是霍亂毒素的活性部分,B亞單位的主要功能是通過與哺乳動物小腸上皮細胞上的單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂GM1結合而使得A亞單位進入細胞。5個CTB與1個CTA以氫鍵和鹽橋連接在一起,形成緊湊而穩(wěn)定的AB5圓筒狀六聚體蛋白?;魜y毒素被認為是最有效的口服免疫原之一??诜﨏T不但可以使機體產(chǎn)生針對CT的免疫反應,而且可以增強與CT同時給予的其他抗原的免疫反應。
霍亂毒素產(chǎn)生佐劑效應的機制可能是:
霍亂毒素可以增強腸粘膜的通透性,從而增加抗原的攝入量;
霍亂毒素選擇性誘導以Th2為主的免疫反應,從而增加特異性黏膜IgA抗體的產(chǎn)生;
霍亂毒素可誘導IL-4和IL-5顯著提高,而IL-2和IFN-gamma水平無明顯變化。
霍亂毒素B亞單位
A亞單位是霍亂毒素的活性部分,B亞單位是與受體結合部位。
CTB基因序列長約380bp,一共編碼124個氨基酸。對CTB基因編碼的124個氨基酸序列進行的分析表明,前17個氨基酸具有明顯的疏水性,形成一個alpha螺旋和一個beta折疊。第21位的Gly和Thr親水性較強,露于分子表面,有利于信號肽酶的切割。
CTB具有很強的免疫原性,能夠有效刺激小腸產(chǎn)生黏膜IgA和血清IgG抗體,具有加強抗原表位抗原性的特點。是目前用的最多的黏膜免疫佐劑之一。
CTB有明顯的促進抗原通過黏膜屏障、加強抗原被DC和其他抗原提呈細胞的提呈作用、增強異質(zhì)性T細胞分泌TGF-beta。
CTB亞單位能與有核細胞的細胞膜上的神經(jīng)節(jié)苷脂(GM1)結合,基于這一原理,CTB可以選擇性地被富含神經(jīng)節(jié)苷脂的GM1的神經(jīng)細胞攝取,從而特異性地標記神經(jīng)細胞。
CTB的應用:
1.免疫佐劑;
2.口服免疫蛋白;
3.霍亂毒素疫苗的開發(fā);
4.神經(jīng)元示蹤;
5.作為膜生物學工具-膜組織探針;
6.感應和誘導膜彎曲。