背景^[1]

凝血酶 (thrombin) 是由凝血酶原活化變成的一種專(zhuān)一性很強(qiáng)的絲氨酸蛋白類(lèi)水解酶, 是機(jī)體凝血系統(tǒng)中的天然成分。凝血酶由308個(gè)氨基酸殘基所組成, 相對(duì)分子質(zhì)量 (Mr) 為36 000;它是一個(gè)雙鏈分子, 由A、B兩條鏈組成, 兩條鏈之間由二硫鍵連接。凝血酶在體內(nèi)以凝血酶原形式存在, 在凝血過(guò)程中, 凝血酶原復(fù)合物將其激活而轉(zhuǎn)變?yōu)橛薪z氨酸蛋白類(lèi)水解活性的凝血酶, 從而促進(jìn)血液凝塊的形成。由于凝血酶在止血與凝血、組織修復(fù)和創(chuàng)傷愈合等方面療效顯著, 具有廣闊的市場(chǎng)前景, 目前已成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

目前市售的凝血酶制品主要來(lái)源于動(dòng)物血漿 (包括牛、羊、豬、蛇) 或人血漿, 這類(lèi)凝血酶不僅可能引起人體的異源性免疫反應(yīng), 而且具有傳播巨細(xì)胞病毒 (CMV) 、EB病毒 (EBV) 、人乳頭瘤病毒 (HPV) 、甲型肝炎病毒 (HAV) 及克雅氏病毒 (CJDV) 等病毒的風(fēng)險(xiǎn)性, 尤其是牛源性凝血酶。因此, 利用基因工程方法制備凝血酶制品成為解決這一問(wèn)題的最理想的途徑。

凝血反應(yīng)^[2]

凝血反應(yīng)是一組極其復(fù)雜的反應(yīng),其具體機(jī)制尚不完全明確。大量的研究表明,在凝血反應(yīng)的起始階段,組織因子(tissue factor,TF)發(fā)揮著重要作用。當(dāng)血管受到損傷時(shí),內(nèi)皮細(xì)胞和血管組織中的組織因子暴露在血液中,并由非活化型組織因子轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨徒M織因子?；罨慕M織因子和凝血七因子FⅦ結(jié)合形成復(fù)合物,并激活凝血十因子FX,活化型十因子FXa催化凝血酶原生成凝血酶(thrombin)。

凝血酶又通過(guò)激活凝血十一因子FⅪ和凝血五因子FV等凝血因子而放大凝血反應(yīng),從而生成更多的凝血酶。凝血酶切割纖維蛋白原產(chǎn)生不可溶的纖維蛋白,纖維蛋白和部分血細(xì)胞形成血栓塊。凝血酶是銜接凝血反應(yīng)激活和纖維蛋白形成的重要一環(huán),在凝血反應(yīng)中起著一個(gè)非常關(guān)鍵的作用,凝血酶的生成量可以間接的表示凝血反應(yīng)的激烈程度。

參考文獻(xiàn)

[1] 重組人凝血酶真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在CHO細(xì)胞中的穩(wěn)定表達(dá).劉霞 劉飛 劉少英

[2] 蛋白二硫鍵異構(gòu)酶調(diào)控組織因子介導(dǎo)的凝血酶生成.陳鳳梧 魯翌