免疫磁珠技術(shù)[1]
免疫磁珠由載體微球和免疫配基結(jié)合而成,載體微球的核心是金屬小顆粒,核心外包裹著一層高分子材料,最外層是功能層,如氨基、羧基、羥基。磁珠具有超順磁性。超順磁性由粒子的量子效應(yīng)產(chǎn)生,使磁珠不會(huì)被磁化。由于磁珠足夠小,因而可以懸浮在液體中保持相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間不聚沉。直徑大于 1 μm 的磁珠可以用普通磁鐵分離,而直徑小于 1 μm 的需要高強(qiáng)度磁場(chǎng)的磁性分離器分離。
無(wú)機(jī)磁珠需要在其表面進(jìn)行高分子有機(jī)合成、生物合成或多孔玻璃反應(yīng)包覆配體才能用作生物分離用。修飾磁珠表面的配體可以對(duì)目的蛋白質(zhì)進(jìn)行親和吸附以達(dá)到分離的結(jié)果。鏈親和素,抗體,A 蛋白,G 蛋白等是經(jīng)常用作蛋白分離的配體。磁珠表面的配體可暴露產(chǎn)生的-COOH,-OH,-NH2 等功能基團(tuán)與蛋白質(zhì)上的相應(yīng)基團(tuán)反應(yīng)而使蛋白耦聯(lián)即可發(fā)生固定化反應(yīng)。在實(shí)驗(yàn)室中還可以將磁珠表面硅烷化,再將配體與其偶聯(lián)后固定化酶,這樣可使酶的活性不至于暴露于無(wú)機(jī)鐵氧體而降低。近年來(lái)非球形的磁性材料諸如磁性納米管也已被鑒定出可以用于特定蛋白的吸附分離。
GST融合蛋白
融合標(biāo)簽技術(shù)廣泛用于基因工程研究,蛋白質(zhì)的表達(dá)經(jīng)常用到各種融合表達(dá)系統(tǒng)。谷胱甘肽巰基轉(zhuǎn)移酶(GST),基因融合表達(dá)體系具有較高的蛋白表達(dá)效率,表達(dá)產(chǎn)物純化方便且利于相關(guān)抗體的制備,是目前應(yīng)用最為廣泛的親和標(biāo)簽之一。
Mag-Beads GST融合蛋白純化磁珠研究進(jìn)展[2]
目前國(guó)外已有公司研制出了用于純化融合蛋白的磁性微粒并得到了實(shí)際應(yīng)用,但價(jià)格都比較高,國(guó)內(nèi)尚不能制備高質(zhì)量的。世紀(jì)年代以來(lái)國(guó)內(nèi)科研人員不斷探索和嘗試,在其研究領(lǐng)域內(nèi)制備各自所需。朱頗安等,應(yīng)用材料學(xué)和免疫學(xué)的新技術(shù)在國(guó)內(nèi)首次研制成功,與國(guó)外同類(lèi)產(chǎn)品進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)比較后認(rèn)為自制符合質(zhì)量控制要求,也因此自制獲得了國(guó)家專(zhuān)利,并被評(píng)為年度武漢市十大科技成果之一。王海青等制備出用于癌癥標(biāo)志物早期診斷的,并對(duì)其進(jìn)行了評(píng)價(jià)。張蓉蓉,李樹(shù)清等分別以分離豬胸膜肺炎放線桿菌,發(fā)現(xiàn)可以顯著提高此病原菌的分離效率。李鶴等采用化學(xué)沉淀法與球磨法制備磁性微球,并采用反相懸浮包埋法制備一,為從豬血清中分離純化開(kāi)辟了一條新的途徑。
參考文獻(xiàn)
[1] Sang Jun Son, Jonathan Reichel, Bo He, et al. Magnetic nanotubes for
magnetic-field-assisted bioseparation,biointeraction and drug delivery[J].
[2] GST抗體包被免疫磁珠納米佐劑的初步研究