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Recombinant Rat IL-17A對(duì)視神經(jīng)損傷模型小鼠神經(jīng)再生的作用

2020/10/26 11:48:35

背景[1]

目前明確的IL-17家族成員有6個(gè), 為IL-17A~IL-17F, 其中Recombinant Rat IL-17A被認(rèn)為是IL-17家族的代表。Recombinant Rat IL-17A最早證明存在于嚙齒動(dòng)物的T淋巴細(xì)胞, 1995年首先從CD4+T細(xì)胞文庫(kù)中克隆獲得。Th17細(xì)胞只是Recombinant Rat IL-17A的來(lái)源之一, 但卻為IL-17A的主要來(lái)源。體內(nèi)多種細(xì)胞諸如胸腺細(xì)胞、上皮細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞在一定環(huán)境下也可產(chǎn)生Recombinant Rat IL-17A。在細(xì)胞因子中, IL-17A具有獨(dú)特的結(jié)構(gòu)。

人IL-17A是由155個(gè)氨基酸組成的同型二聚體, 相對(duì)分子量為3 000, N端為1923個(gè)殘基組成的信號(hào)多肽, 定位于染色體2q31, 重組IL-17A以糖基化和非糖基化兩種形式表達(dá)。

Recombinant Rat IL-17A細(xì)胞因子家族成員 (IL-17A, IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E, IL-17F) 在氨基酸水平享有20%~50%同源性。IL-17受體 (IL-17R) 家族具有5種受體 (IL-17RA~IL-17RE) 。IL-17RA是由293個(gè)氨基酸胞外區(qū)、21個(gè)氨基酸跨膜區(qū)及525個(gè)氨基酸胞內(nèi)區(qū)組成。有報(bào)道指出, IL-17RC與IL-17RA形成復(fù)合物, 并且在IL-17信號(hào)途徑中發(fā)揮十分重要的作用。

Recombinant Rat IL-17A對(duì)視神經(jīng)損傷模型小鼠神經(jīng)再生的作用[2]

背景:實(shí)驗(yàn)證明在角膜損傷模型中, Recombinant Rat IL-17A參與的炎癥反應(yīng)在角膜神經(jīng)再生過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。

目的:進(jìn)一步驗(yàn)證Recombinant Rat IL-17AA對(duì)視神經(jīng)損傷模型小鼠神經(jīng)再生的作用。

方法:構(gòu)建白細(xì)胞介素17A過(guò)表達(dá)腺病毒載體 (AV-IL-17A-GFP) , 構(gòu)建白細(xì)胞介素17A表達(dá)載體, 包裝并純化腺病毒, 以綠色熒光蛋白空載體包裝的腺病毒為對(duì)照組 (AV-GFP對(duì)照組) ;用病毒感染PC12細(xì)胞并通過(guò)ELISA檢測(cè)Recombinant Rat IL-17A表達(dá)效率, 采用顯微注射方法將病毒注射到小鼠玻璃體內(nèi), 利用免疫熒光檢測(cè)視神經(jīng)中白細(xì)胞介素17A的表達(dá), 構(gòu)建小鼠視神經(jīng)損傷模型, 檢測(cè)受損視神經(jīng)再生情況。

結(jié)果與結(jié)論:

 (1) 與AV-GFP對(duì)照組相比, ELISA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)AV-IL-17A-GFP組中白細(xì)胞介素17A在PC12細(xì)胞中高度表達(dá);

 (2) 免疫熒光染色表明Recombinant Rat IL-17A在小鼠視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和視神經(jīng)中有效表達(dá), AV-IL-17A-GFP組中再生的視神經(jīng)纖維數(shù)量顯著多于對(duì)照組, 且長(zhǎng)度顯著長(zhǎng)于對(duì)照組 (P<0.05) ;

 (3) 結(jié)果說(shuō)明, 白細(xì)胞介素17A腺病毒載體可在小鼠視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞和視神經(jīng)中表達(dá), 并且能夠促進(jìn)受損視神經(jīng)的再生。

參考文獻(xiàn)

[1] 白細(xì)胞介素-17A與支氣管哮喘的研究進(jìn)展.齊麗.天津市泰達(dá)醫(yī)院急診科

[2] 白細(xì)胞介素17A在視神經(jīng)損傷模型小鼠神經(jīng)再生中的作用.李艷芬.葉曉陽(yáng).陳曉帆,張偉.北京大學(xué)深圳北京大學(xué)香港科技大學(xué)醫(yī)學(xué)中心

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