背景^[1-3]

人淋巴母細(xì)胞是處于增殖狀態(tài)的淋巴細(xì)胞，其體積增大，RNA和蛋白質(zhì)合成率增高，受抗原刺激后，可發(fā)生活化、增殖和分化成淋巴細(xì)胞。

淋巴細(xì)胞（lymphocyte）是白細(xì)胞的一種，是體積最小的白細(xì)胞。其由淋巴器官產(chǎn)生，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中，是機體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者，是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵”。

人淋巴母細(xì)胞

淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識別功能的細(xì)胞系，按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T淋巴細(xì)胞（又名T細(xì)胞）、B淋巴細(xì)胞（又名B細(xì)胞）和自然殺傷(NK)細(xì)胞。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞，它們的最初來源是相同的，都來自造血組織。

淋巴細(xì)胞是免疫反應(yīng)的核心。根據(jù)淋巴細(xì)胞的發(fā)生來源、形態(tài)結(jié)構(gòu)、表面標(biāo)志和免疫功能等方面的不同，可分為T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞三類。

T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟。

當(dāng)受抗原刺激后，T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，再分化為致敏T淋巴細(xì)胞，參與細(xì)胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等；而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞，再分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體），參與體液免疫，其功能是產(chǎn)生抗體，提呈抗原，以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié)；NK細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng)，具有殺傷靶細(xì)胞的作用。

應(yīng)用^[4][5]

用于EB病毒轉(zhuǎn)化淋巴母細(xì)胞中相關(guān)基因表達的檢測與分析研究

研究EB病毒誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的分子機制提供實驗依據(jù)。

方法：從5例健康成人外周靜脈血中分離出淋巴細(xì)胞，在體外利用EBV誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化建立永生化的淋巴母細(xì)胞系。提取轉(zhuǎn)化淋巴母細(xì)胞及其配對的健康人淋巴細(xì)胞的總RNA和總蛋白，應(yīng)用實時定量PCR和Western blot方法，分別檢測E2F1、PLK1、BIRC5及PTPN11基因在5例轉(zhuǎn)化淋巴母細(xì)胞及其匹配的健康人淋巴細(xì)胞中的表達情況。

結(jié)果：成功建立EBV轉(zhuǎn)化的淋巴母細(xì)胞系，得到了5例健康人轉(zhuǎn)化淋巴母細(xì)胞，檢測了E2F1、PLK1、BIRC5及PTPN11基因在5例轉(zhuǎn)化的淋巴母細(xì)胞及其配對的健康人淋巴細(xì)胞中的表達情況。E2F1基因在兩種細(xì)胞中均表達，與正常人淋巴細(xì)胞相比，轉(zhuǎn)化細(xì)胞中E2F1的mRNA表達上調(diào)3.161倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；

Western blot結(jié)果顯示，與正常人淋巴細(xì)胞相比，E2F1在轉(zhuǎn)化細(xì)胞中的蛋白表達上調(diào)1.850倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

PLK1基因在兩種細(xì)胞中均表達，與正常人淋巴細(xì)胞相比，淋巴母細(xì)胞中PLK1的mRNA表達上調(diào)11.329倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）；

Western blot結(jié)果顯示，與正常人淋巴細(xì)胞相比，PLK1在轉(zhuǎn)化細(xì)胞中的蛋白表達上調(diào)8.140倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）。

BIRC5基因在兩種細(xì)胞中均表達，相比正常人淋巴細(xì)胞，淋巴母細(xì)胞中BIRC5的mRNA表達上調(diào)7.921倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.001）；

Western blot結(jié)果顯示，與正常人淋巴細(xì)胞相比，BIRC5在轉(zhuǎn)化細(xì)胞中的蛋白表達上調(diào)2.065倍，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。

參考文獻

[1]Targeting survivin overcomes drug resistance in acute lymphoblastic leukemia.Park E,Gang EJ,Hsieh YTet al.Blood.2011

[2]Epstein-Barr virus infection.Cohen J I.The New England Quarterly.2000

[3]The proto-oncogene c-myc is a direct target gene of Epstein-Barr virus nuclear antigen 2.Kaiser C,Laux G,Eick D,et al.Journal of Virology.1999

[4]MALT lymphomas:pathogenesis can drive treatment.Bertoni F,Coiffier B,Salles G,Stathis A,Traverse-Glehen A,Thieblemont C,Zucca E.Oncology（Williston Park）.2011

[5]付婷.EB病毒轉(zhuǎn)化淋巴母細(xì)胞中相關(guān)基因表達的檢測與分析[D].南華大學(xué),2013.