背景^[1-3]

上皮細胞生長因子指在組織培養(yǎng)中，除了氨基酸、維生素、葡萄糖以及無機鹽等正常成分之外，可以代替培養(yǎng)基血清高分子物質(zhì)的而促進細胞生長的物質(zhì)。

生長因子多為廣義的肽激素，有胰島素、表皮生長因素（EGF）、成纖細胞生長因素（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）、血小板來源增殖因素（platelet－derivedgrowth factor，PDGF）以及生長激素釋放抑制因子（somatostatin=SRIH）等。在肽激素之外，皮質(zhì)醇和甲狀腺素（T3）等也屬于生長因子。

上皮細胞生長因子結(jié)構(gòu)圖

EGF是人體內(nèi)存在的一種生長因子，它的主要功能是促進皮膚細胞的分裂。研究表明：極微量的EGF能強烈刺激細胞生長，抑制衰老基因表達，阻止皮膚衰老，使皮膚各組成份保持生理狀態(tài)。

EGF能促進上皮細胞、成纖維細胞的增殖；增強表皮細胞的活力；延緩表皮細胞的老化，使肌膚各組成成份保持生理狀態(tài)。高活性的EGF才能促進皮膚細胞的分裂和生長，此外它還能刺激細胞外一些大分子（如透明質(zhì)酸和膠原白等）的合成與分泌。

重組人表皮生長因子（rh-EGF），大量存在于人體上皮細胞內(nèi)，它可刺激上皮細胞和內(nèi)皮細胞生長，使新的表皮細胞不斷長成，將死皮層推動并逐漸脫落，保持肌膚細嫩光滑。同時促進皮膚各種細胞的新陳代謝，增強細胞吸收營養(yǎng)物質(zhì)。

應(yīng)用^[4][5]

用于調(diào)控HIF-1α對鼻黏膜上皮細胞生長因子表達的影響研究

用短發(fā)夾RNA（shRNA）特異性沉默人鼻黏膜上皮細胞（human nasal epithelial cells,HNEC）缺氧誘導(dǎo)因子-1α（hypoxia inducible factor-1αHIF-1α）,觀察其對HNEC表達血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、轉(zhuǎn)化生長因子（transforming growth factor,TGF）β1、堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor,bFGF/fibroblast growth factor-2,FGF-2）三種生長因子的影響。

方法：取因鼾癥行下鼻甲切除術(shù)患者的下鼻甲黏膜,體外培養(yǎng)原代細胞,體外設(shè)計合成以腺病毒為載體GFP標(biāo)記的shRNA（包括ad-HIF shRNA及ad-HIF shRNA-neg）.將細胞分為空白對照組、無義寡核苷酸陰性對照組（ad-HIF shRNA-neg）、ad-HIF shRNA干擾組、低氧培養(yǎng)組。

蛋白質(zhì)免疫印跡試驗Western blot技術(shù)檢測轉(zhuǎn)染病毒后HNEC中HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF的蛋白的表達情況；RT-PCR（Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction）HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF的mRNA的表達情況。結(jié)果轉(zhuǎn)染ad-HIF shRNA-neg前后,HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF的蛋白差異（q1=1.3167;q2=0.7513;q3=0.3251;q4=0.6592）及其mRNA差異（q1=2.3514;q2=37.0480;q3=17.1131;q4=1.0917）均無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05）。

與陰性對照組及空白對照組相比,轉(zhuǎn)染ad-HIF shRNA后,]BF-1α表達蛋白下降40%（q=31.4690）,mRNA表達下降39%（q=16.5900）,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）；同時VEGF.TGF-β1、bFGF的蛋白及mRNA表達也隨之下降,蛋白差異（q1=19.1571；q2=33.8090；q3=45.8940）及mRNA差異（q1=22.3920；q2=17.8800;q3=11.5991）均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）；

與陰性對照組及空白對照組相比,低氧培養(yǎng)HNEC,其HIF-1α表達蛋白升高50%（q=32.3540）,mRNA表達升高46%（q=15.4570）差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）；

同時VEGF.TGF-β1、bFGF的蛋白及mRNA表達也隨之升高,蛋白差異（q1=20.2410;q2=35.2010;q3=47.3150）及mRNA差異（q1=21.4713；q2=18.3710；q3=10.3651）均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。

參考文獻

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