背景[1-3]
苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體是可以特異性結(jié)合苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶的一類多克隆抗體，主要用于檢測(cè)苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多種免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)。
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶水平。用純化的苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶，再與HRP標(biāo)記的苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶濃度。
PNMT是一種位于腎上腺髓質(zhì)的酶，它催化兒茶酚胺生物合成途徑的最后一步，該過(guò)程將去甲腎上腺素甲基化形成腎上腺素（腎上腺素）。PNMT具有β-咔啉2N-甲基轉(zhuǎn)移酶活性。PNMT參與調(diào)節(jié)腎上腺素的產(chǎn)生。糖皮質(zhì)激素受體形成獨(dú)立于DNA結(jié)合域的PNMT的多聚體。PNMT表達(dá)在小鼠妊娠后期受AP2-alpha和糖皮質(zhì)激素的調(diào)節(jié)。
應(yīng)用[4][5]
用于苯乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶基因多態(tài)性與湖南地區(qū)漢族人群原發(fā)性高血壓易感性的關(guān)聯(lián)研究
高血壓病(Essential Hypertension,EH)是目前最常見(jiàn)的心血管病之一,是全球范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題。原發(fā)性高血壓是遺傳易感性和環(huán)境因素共同決定的復(fù)雜疾病。人群30～60%的血壓變異歸因于遺傳因素。
目前對(duì)高血壓病遺傳危險(xiǎn)因素的研究,大多采用候選基因的策略,位于17號(hào)染色體q21位置上的苯乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(PNMT)基因是其中之一。PNMT是兒茶酚胺生物合成的終點(diǎn)酶,能催化去甲腎上腺素生成腎上腺素,其活性變化可影響體內(nèi)去甲腎上腺素和腎上腺素的水平,從而參與高血壓病的病理生理過(guò)程,故編碼PNMT的基因是研究原發(fā)性高血壓易感性重要的候選基因之一。
探討苯乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(PNMT)G-390A基因多態(tài)性與湖南地區(qū)漢族人群原發(fā)性高血壓遺傳易感性的關(guān)系。
方法:應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)的分析方法,在400例原發(fā)性高血壓患者和388例健康人群中對(duì)PNMT基因PNMT G-390A位點(diǎn)進(jìn)行基因分型。應(yīng)用χ~2檢驗(yàn)比較組間基因型及A等位基因頻率的分布的異同,并檢驗(yàn)不同性別組間基因型及A等位基因頻率的分布異同;
應(yīng)用非條件Logistic回歸分析對(duì)風(fēng)險(xiǎn)因素進(jìn)行校正,確定PNMT基因型與原發(fā)性高血壓遺傳易感性間的相關(guān)性關(guān)系;應(yīng)用單向方差分析檢驗(yàn)高血壓組與對(duì)照組不同基因型的一般情況差異。
參考文獻(xiàn)
[1]Association study between reward dependence temperament and a polymorphism in the phenylethanolamine N-methyltransferase gene in a Japanese female population[J].Emi Yamano,Tokiko Isowa,Yoshiro Nakano,Fumihiko Matsuda,Tomoko Hashimoto-Tamaoki,Hideki Ohira,Shinji Kosugi.Comprehensive Psychiatry.2008(5)
[2]Significance of Heritability in Primary and Secondary Pediatric Hypertension[J].Renee F.Robinson,Donald L.Batisky,John R.Hayes,Milap C.Nahata,John D.Mahan.American Journal of Hypertension.2005(7)
[3]Arterial hypertension as a public health issue in Slovenia[J].Rok Accetto.Blood Pressure.2005(S2)
[4]Hypertension and SNP genotyping in antihypertensive treatment[J].Lisa Kurland,Ulrika Liljedahl,Lars Lind.Cardiovascular Toxicology.2005(2)
[5]陳安.苯乙醇胺-N-甲基轉(zhuǎn)移酶基因多態(tài)性與湖南地區(qū)漢族人群原發(fā)性高血壓易感性的關(guān)聯(lián)研究[D].中南大學(xué),2009.