背景^[1]

目前全球越來(lái)越多的重組抗原及重組抗體用于醫(yī)療,尤其針對(duì)腫瘤、自身免疫病等難治病癥,以及體外診斷試劑。越來(lái)越多的高校和企業(yè)開始重視重組蛋白新藥的開發(fā),這就要求能夠快速生產(chǎn)足夠候選蛋白用于臨床前研究,因此能夠快速生產(chǎn)毫克到克級(jí)別的重組蛋白瞬時(shí)表達(dá)體系開始得到廣泛應(yīng)用。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來(lái)越廣泛。

簡(jiǎn)介^[1]

細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控原件的分析。一般來(lái)說(shuō)，細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法中超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)分析結(jié)果，常常用到一些報(bào)告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來(lái)幫助檢測(cè)。

應(yīng)用特性^[1]

目的：快速分析

篩選方法：抗生素抗性

表達(dá)持續(xù)時(shí)間：隨細(xì)胞分裂而稀釋至丟失48－72小時(shí) 

目的DNA與宿主染色體：未整合

主要參考文獻(xiàn)

[1] 孫靜靜，李桂林，周雷鳴，周偉偉，趙巧輝；哺乳動(dòng)物細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)研究進(jìn)展。《中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù)》 2019年03期