背景[1]
隨著細(xì)胞治療和基因治療技術(shù)的不斷發(fā)展,細(xì)胞的相關(guān)研究已經(jīng)逐漸成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)乃至整個生命科學(xué)領(lǐng)域中的研究熱點(diǎn),細(xì)胞培養(yǎng)已經(jīng)成為科研中一個很重要的技術(shù),而要獲得較純的目的細(xì)胞,流式細(xì)胞分選、純化已成為關(guān)鍵的問題。
簡介[1]
流式細(xì)胞分選是把一種細(xì)胞從多細(xì)胞樣品中分離出來。用抗體標(biāo)記細(xì)胞,同時(shí)被用的抗體被螢光標(biāo)記或連接免疫磁珠或其它,利用螢光和免疫磁珠的特性來分離細(xì)胞。
細(xì)胞的分選是通過分離含有單細(xì)胞的液滴而實(shí)現(xiàn)的。在流動室的噴口.上配有一個超高頻電晶體,充電后振動,使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測定細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負(fù)不同的電荷,當(dāng)液滴流經(jīng)帶有幾千伏特的偏轉(zhuǎn)板時(shí),在高壓電場的作用下偏轉(zhuǎn),落入各自的收集容器中,不予充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。
應(yīng)用[1]
1、利用流式細(xì)胞分選技術(shù)分選腫瘤干細(xì)胞
腫瘤干細(xì)胞是腫瘤中具有自我更新.無限增殖及多向分化潛能的細(xì)胞,這部分細(xì)胞雖然只占少部分,但在腫瘤的發(fā)生.演進(jìn)、復(fù)發(fā)耐藥及逃逸免疫系統(tǒng)的識別和清除過程中可能發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。
2、利用流式細(xì)胞分選技術(shù)分選外周血細(xì)胞
基于流式細(xì)胞儀的分選功能,根據(jù)細(xì)胞的大小以及顆粒度等特征,對白細(xì)胞直接進(jìn)行分選獲取人外周血中的單核細(xì)胞的方法,既避免了多次重復(fù)離心,又能分選得到純度在80%-90%之間的單核細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),為深人研究單核細(xì)胞提供了良好的技術(shù)平臺。
3、利用流式細(xì)胞分選技術(shù)分選染色體
通過流式分選的方法得到高質(zhì)量的單個染色體,該方法可同時(shí)純化大量染色體,為后續(xù)試驗(yàn),如植物基因組測序等提供了方便。
4、利用流式細(xì)胞分選技術(shù)分選造血干細(xì)胞
通過配制HSCs體外培養(yǎng)液并結(jié)合流式細(xì)胞分選技術(shù),建立了一種在體外不需要基質(zhì)細(xì)胞支持的,穩(wěn)定的,高通量培養(yǎng)單個HSC形成-個血細(xì)胞集落的實(shí)驗(yàn)方法。
5、利用流式細(xì)胞分選技術(shù)分選神經(jīng)細(xì)胞
建立了一種較為完善的流式細(xì)胞儀分選在體模型中神經(jīng)細(xì)胞的技術(shù)方法,該分選方法可以同時(shí)獲得純度高、數(shù)量多的不同種類的神經(jīng)細(xì)胞。
主要參考文獻(xiàn)
[1] 陳少堅(jiān) 郭風(fēng)勁;流式細(xì)胞分選技術(shù)應(yīng)用的研究進(jìn)展?!吨腥A實(shí)驗(yàn)外科雜志》 2011年 第9期。