背景[1-3]
人彈性蛋白(ELN)ELISA KIT采用定量夾心酶免疫測定技術(shù)。對ELN特異的抗體已預(yù)先包被在微板上。將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品吸取到孔中，并且存在的任何ELN都被固定的抗體結(jié)合。除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后，將對ELN特異的生物素偶聯(lián)抗體添加到孔中。洗滌后，將抗生物素蛋白綴合的辣根過氧化物酶（HRP）加入孔中。洗滌以除去任何未結(jié)合的抗生物素蛋白-酶試劑后，將底物溶液添加至孔中，并且顏色與初始步驟中結(jié)合的ELN的量成比例。停止顯色并測量顏色的強(qiáng)度。結(jié)果計算：將每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的重復(fù)讀數(shù)取平均值，然后減去平均零標(biāo)準(zhǔn)品光密度。通過使用能夠生成四參數(shù)對數(shù)（4-PL）曲線擬合的計算機(jī)軟件來減少數(shù)據(jù)來創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線?；蛘撸ㄟ^在x軸上繪制每種標(biāo)準(zhǔn)品的平均吸光度對y軸上的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過圖中的點(diǎn)繪制擬合曲線?？梢酝ㄟ^繪制ELN濃度的對數(shù)與OD的對數(shù)來線性化數(shù)據(jù)，并且可以通過回歸分析確定擬合線。此過程將產(chǎn)生足夠但不太精確的數(shù)據(jù)擬合。如果樣品已稀釋，將濃度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出必須由稀釋因子相乘。
彈性蛋白是生皮組織中彈性纖維(elastic fiber)的主要成分。彈性蛋白的肽鏈含有713個以上的氨基酸殘基。不同于膠原和角蛋白，彈性蛋白的氨基酸序列中不存在貫穿整個肽鏈的連續(xù)的重復(fù)性周期結(jié)構(gòu)，但是存在交替的疏水和親水性膚段。由氧化賴氨酰形成的鎖鏈素和開鏈鎖鏈素是彈性蛋白特有的交聯(lián)結(jié)構(gòu)。這些交聯(lián)結(jié)構(gòu)格兩條以上的隊(duì)維結(jié)合起來。彈性強(qiáng)白的二級外構(gòu)可能是無規(guī)在曲與題定的組合，彈性是彈性蛋白的最重要物理化學(xué)性質(zhì)。
應(yīng)用[4][5]
人彈性蛋白(ELN)ELISA KIT用于彈性蛋白及其代謝通路相關(guān)基因SNPs及單體型與長沙漢族人群腦出血的關(guān)系研究。
腦卒中(Stroke)為世界第二大常見死亡原因及成人致殘的首要原因,腦出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)是其最主要的亞型之一,具有高死亡率、高致殘率的特點(diǎn)。由于腦出血缺乏有效的治療手段,因此如何早期識別其相關(guān)危險因素并進(jìn)行有效的干預(yù)成為了減輕疾病負(fù)擔(dān)的主要手段。目前普遍認(rèn)為,腦出血是一種受多個易感微效基因和環(huán)境多因素綜合作用的復(fù)雜疾病。因此,對腦出血候選基因單核苷酸多態(tài)性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)的研究將有助于從分子水平闡明腦出血的本質(zhì),為腦出血高危人群的篩查及防治提供堅實(shí)的理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。大量研究發(fā)現(xiàn),彈性蛋白(Elastin,ELN)及與其代謝相關(guān)的基質(zhì)金屬蛋白酶-9(Matrix metalloproteinases-9,MMP-9)、組織型基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(Tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)不僅與原發(fā)性高血壓、動脈粥樣硬化、顱內(nèi)微小動脈瘤形成等多個腦出血的高危因素和病理過程密切相關(guān),還可直接通過過度降解血管壁成分,破壞血腦屏障,誘發(fā)腦出血。
參考文獻(xiàn)
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[3]Induced Chromosome Deletion in a Williams-Beuren Syndrome Mouse Model Causes Cardiovascular Abnormalities[J].Goergen,Craig J,Li,Hong-hua,Francke,Uta,Taylor,Charles A.Journal of Vascular Research.2011(2)
[4]Plasma level of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 but not that of matrix metalloproteinase-8 predicts survival in head and neck squamous cell cancer[J].Pratikshya Pradhan-Palikhe,Tiina Vesterinen,Jussi Tarkkanen,Ilmo Leivo,Timo Sorsa,Tuula Salo,Petri S.Mattila.Oral Oncology.2010(7)
[5]王紅星.彈性蛋白及其代謝通路相關(guān)基因SNPs及單體型與長沙漢族人群腦出血的關(guān)系研究[D].中南大學(xué),2012.