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植物基因組DNA抽提緩沖液的技術(shù)背景

2020/2/17 11:50:57

植物基因組DNA抽提緩沖液是氯化銫法提取植物基因組DNA中的試劑,也是植物基因組DNA提取中不可缺少的試劑。植物基因組DNA抽提緩沖液主要由由氯化鈉、EDTA溶液(PH8.0)、Tris-HCL(PH8.0)、蛋白酶K組成。植物基因組DNA提取試劑用于簡(jiǎn)單快速提取植物基因組DNA,先將新鮮植物樣本研磨破碎細(xì)胞壁,加入CTBA抽提液使細(xì)胞膜破裂同時(shí)將核酸與植物多糖等雜質(zhì)分開。

植物基因組DNA抽提緩沖液基本信息[1][2]

緩沖液規(guī)格:100ml 

緩沖液分類:核酸提取 

儲(chǔ)存條件:室溫12個(gè)月 

產(chǎn)品用途:氯化銫法提取植物基因組DNA 

植物基因組DNA抽提緩沖液作為實(shí)驗(yàn)用品供研究用不能直接用于人體。 

植物基因組DNA抽提緩沖液技術(shù)背景[1][2]

在基因操作實(shí)驗(yàn)中,選擇緩沖液的主要原則是考慮DNA的穩(wěn)定性及緩沖液成分不產(chǎn)生干擾作用。磷酸鹽緩沖系統(tǒng)(pKa=7.2)和硼酸系統(tǒng)(pKa=9.24)等雖然也都符合細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的生理范圍(pH),可作DNA的保存液,但在轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)時(shí),磷酸根離子的種類及數(shù)量將與Ca2+產(chǎn)生Ca3(PO4)2沉淀,在DNA反應(yīng)時(shí),不同的酶對(duì)輔助因子的種類及數(shù)量要求不同,有的要求高離子濃度,有的則要求低鹽濃度,采用Tris-HCl(pKa=8.0)的緩沖系統(tǒng),由于緩沖液是TrisH+/Tris,不存在金屬離子的干擾作用,故在提取或保存DNA時(shí),大都采用Tris-HCl系統(tǒng),而TE緩沖液中的EDTA更能穩(wěn)定。

主要參考文獻(xiàn)

[1]陳惠云;孫志棟;茅軼??;王曉武;葛紅。春蘭基因組DNA提取方法的研究。分子植物育種。2006年1期。

[2]雷婭紅 進(jìn)境多年生黑麥草和白三葉種帶真菌多樣性研究 蘭州大學(xué) 碩士生學(xué)位論文

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