替西羅莫司(temsirolimus)，又名西羅莫司酯化物,其是一種由惠氏醫(yī)藥(現(xiàn)己合并到輝瑞醫(yī)藥)研發(fā)用于治療進(jìn)展性腎癌的靶向性抗腫瘤藥物，也是第一個(gè)治療腎癌的靶向治療藥物，而且是唯一上市的特異性抑制mTOR激酶的藥物。

mTOR激酶是用于調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)和細(xì)胞存活的重要蛋白質(zhì)。在體外研究中發(fā)現(xiàn)，替西羅莫司抑制mTOR激酶后導(dǎo)致一定的血管生長(zhǎng)因子如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的水平下降，進(jìn)而阻止新生血管的發(fā)展，結(jié)果導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡。

在我國，該藥物目前尚未上市，但國外已經(jīng)完成的各期臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，西羅莫司對(duì)晚期腎癌有較好的療效，具有廣闊的應(yīng)用前景。

1)坦羅莫司半成品的制備

將8.3g坦羅莫司粗品(純度75.68％，西羅莫司3.47％，異構(gòu)體16.48％，面積歸一化法，下同)用25mL乙酸乙酯溶解后，上樣于正相硅球填料柱(南京百賽生物色譜技術(shù)有限公司，下同，粒徑5μm)，用乙酸乙酯：正庚烷混合溶劑體系進(jìn)行梯度洗脫，0～10min，乙酸乙酯/正庚烷(v/v，下同)＝60：40，在10～100min，乙酸乙酯/正庚烷從60：40逐漸變化到100：0，系統(tǒng)溫度為20℃，收集組分，30℃下減壓濃縮至干，得到6.8g坦羅莫司半成品(純度84.78％，西羅莫司0.02％，異構(gòu)體13.23％)。

2)高純度坦羅莫司的制備

將上述6.8g坦羅莫司半成品用21mL乙腈溶解后，上樣于反相C18填料柱(日本大曹株式會(huì)社，下同，粒徑5μm)，用乙腈：1mmol/L的甲酸水溶液(pH3.5)混合溶劑體系進(jìn)行梯度洗脫，0～10min，乙腈/甲酸水溶液＝50：50，10～100min，乙腈/甲酸水溶液從50：50逐漸變化到80：20，系統(tǒng)溫度為20℃，收集組分，30℃減壓濃縮至少量，用乙酸乙酯萃取，飽和氯化鈉溶液洗滌，分離有機(jī)相，干燥，過濾，30℃下減壓濃縮至干，得到4.9g高純度坦羅莫司(純度99.94％，西羅莫司未檢出，異構(gòu)體0.08％，其他單個(gè)雜質(zhì)均<0.1％)。

Temsirolimus抑制核糖體蛋白S6磷酸化,作用于PTEN陽性DU145細(xì)胞比作用于PTEN陰性PC-3細(xì)胞更有效,且抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，和細(xì)胞的克隆生存，這種作用存在濃度依賴性。 Temsirolimus按100 ng/mL劑量處理原代人淋巴細(xì)胞性白血病(ALL) 細(xì)胞，顯著抑制增殖，且誘導(dǎo)凋亡。在 FKBP12存在時(shí), Temsirolimus 有效抑制mTOR 激酶活性，IC50為1.76 μM, 與Rapamycin（IC50為1.74 μM）類似。Temsirolimus按納摩爾濃度(10 nM 到<5 μM) 處理，通過FKBP12依賴機(jī)制，具有適度的選擇性抗增殖活性，在低微摩爾濃度 (5-15 μM)時(shí)，可以完全抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖，涉及FKBP12非依賴性的 mTOR信號(hào)阻斷。Temsirolimus 按微摩爾而不是納摩爾濃度 (20 μM)處理，顯著降低全部蛋白質(zhì)合成，也顯著降低多聚核糖體的分解, 伴隨著翻譯延伸因子 eEF2和翻譯起始因子eIF2A的磷酸化快速提高。