"1.1B4 Cells(贈送Str鑒定報告)|人胰腺癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。

細胞生長：貼壁

MKN74細胞類似產品：：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞

U20-S細胞類似產品：：MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞

PC615.3細胞類似產品：：HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞

Hs 636 T細胞類似產品：：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞

143BTK-細胞類似產品：：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞

1.1B4 Cells(贈送Str鑒定報告)|人胰腺癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周２-３次。

MAD109細胞類似產品：：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞

TCam 2細胞類似產品：：COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞

BC-PAP細胞類似產品：：NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞

ACC-M細胞類似產品：：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞

NCTC clone 1469細胞類似產品：：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

1.1B4 Cells(贈送Str鑒定報告)|人胰腺癌細胞

細胞生長特性：貼壁生長

Mono-Mac-1細胞類似產品：：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞

LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞類似產品：：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞

TEC細胞類似產品：：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞

WM115-mel細胞類似產品：：L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞

Ku812F細胞類似產品：：159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞

HCC-94細胞類似產品：：RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞

造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中Zui常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°CGAO壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不HAO，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且HAO幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求GAO，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！

貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較GAO的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不HAO，有證據嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很HAO并且不損失細胞！

HEK-293FT細胞類似產品：：B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞

PC3M-1E8細胞類似產品：：CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞

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SN12C細胞類似產品：：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞

SK Mel 24細胞類似產品：：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞

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HPAEpiC細胞類似產品：：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞

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HCC202細胞類似產品：：NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞

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Lu99A細胞類似產品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

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OPM-2細胞類似產品：：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞

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NS1-Ag4/1細胞類似產品：：MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞

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HS-695T細胞類似產品：：HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞

Clone 929細胞類似產品：：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞

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SBC-3細胞類似產品：：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞

M 1細胞類似產品：：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞

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PC-3M-IE8細胞類似產品：：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞

TE11細胞類似產品：：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞

MAEC細胞類似產品：：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞

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J-774A.1細胞類似產品：：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞

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MSF細胞類似產品：：H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞

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1.1B4 Cells(贈送Str鑒定報告)|人胰腺癌細胞

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