"Hs 729.T Cells(贈送Str鑒定報告)|人橫紋肌肉瘤細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

TE-85細胞類似產品：：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞

HIT.T15細胞類似產品：：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞

Panc 5.04細胞類似產品：：WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞

NBLAN5T細胞類似產品：：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞

LM2-4175細胞類似產品：：Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞

Hs 729.T Cells(贈送Str鑒定報告)|人橫紋肌肉瘤細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

細胞傳代方法：１：２傳代；每周換液２-３次。

253JBV細胞類似產品：：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞

SUDHL4細胞類似產品：：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞

UCLA-SO-14細胞類似產品：：NCI-H650細胞、HDSMC細胞、H-711細胞

RAMOS2G64C10細胞類似產品：：McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞

IAR-20細胞類似產品：：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

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細胞生長特性：貼壁生長

CCD-19Lu細胞類似產品：：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞

EJ1細胞類似產品：：SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞

Sp2/O-Ag14細胞類似產品：：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞

HCC-2185細胞類似產品：：hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞

MFE-296細胞類似產品：：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞

A427細胞類似產品：：CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間Zui長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請YOU先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做HAO照片記錄并聯(lián)系實驗室。

細胞株(系)的使用，為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化，因而細胞失去原有的遺傳性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前，細胞凍存Zui常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增GAO，pH值改變，部分蛋白質由于上述原因而變性，引起細胞內部空間結構紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內結構成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分，減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提GAO細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外，減少胞內形成冰結晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。

NCIH1563細胞類似產品：：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞

32D CL3細胞類似產品：：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞

MCF7-CTRL細胞類似產品：：SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞

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SW-756細胞類似產品：：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞

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MSCs（mUCMSCs）細胞類似產品：：NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞

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H1238細胞類似產品：：Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞

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Douglas Foster-1細胞類似產品：：NCI-H2227細胞、APRE-19細胞、NIH:OVCAR-3細胞

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L1210細胞類似產品：：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞

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MM1S細胞類似產品：：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞

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Hep-G2/C3A細胞類似產品：：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞

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M14細胞類似產品：：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞

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CL40細胞類似產品：：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞

Neuro2a細胞類似產品：：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞

MOLP-8細胞類似產品：：Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞

32D.3細胞類似產品：：TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞

Lec1細胞類似產品：：ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞

G519細胞類似產品：：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞

RCS細胞類似產品：：A375細胞、GM17219細胞、PANC3.27細胞

NRK 49F細胞類似產品：：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞

SUM-149細胞類似產品：：RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞

VMM-5A細胞類似產品：：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞

OE-33細胞類似產品：：MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞

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NS653細胞類似產品：：H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞

FHs74 Int細胞類似產品：：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞

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RBL-1細胞類似產品：：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞

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UM2細胞類似產品：：Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞

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C666-1細胞類似產品：：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞

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ML2細胞類似產品：：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞

MOLP-8細胞類似產品：：Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞

MTC-TT細胞類似產品：：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞

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