"NRK-49F Cell|大鼠正常腎成纖維細胞

細胞背景資料：腎；成纖維細胞；自發(fā)永生

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良HAO(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，Zui后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

細胞生長：貼壁

NS1細胞類似產(chǎn)品：：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞

T-ALL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H716細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、VP229細胞

B16-F0細胞類似產(chǎn)品：：Hs737T細胞、RK 13細胞、H1155細胞

CL MC/9細胞類似產(chǎn)品：：HFL 1細胞、NK92細胞、UCLA-SO-M20細胞

NS1-Ag 4/1細胞類似產(chǎn)品：：Karpas299細胞、786-O細胞、COLO-1細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NRK-49F Cell|大鼠正常腎成纖維細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

CHL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞

HTori 3細胞類似產(chǎn)品：：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞

HARA-B細胞類似產(chǎn)品：：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞

LS 180細胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

CHL-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-128細胞、HEK/EBNA細胞、MGH-U1細胞

HTori 3細胞類似產(chǎn)品：：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞

HARA-B細胞類似產(chǎn)品：：HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞

LS 180細胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細胞的污染。細菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因為病毒顆粒別微小，一般的實驗室都沒能力檢查細胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細胞內(nèi)，對整個細胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會使研究人員長期得到受病毒影響的細胞的實驗結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細胞壁，在細胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時對常用于細胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會影響實驗的結(jié)果。培養(yǎng)多種細胞時操作不當，會導(dǎo)致細胞的交叉污染。由于不同細胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細胞終會完全取代被污染的細胞。

FRTL-5細胞類似產(chǎn)品：：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞

ketr 3細胞類似產(chǎn)品：：HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞

Y79細胞類似產(chǎn)品：：CHL-1細胞、MAVER細胞、NCI-H211細胞

TE-14細胞類似產(chǎn)品：：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞

TCCPAN2細胞類似產(chǎn)品：：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞

H1882細胞類似產(chǎn)品：：HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞

Reuber-H-35 hepatoma細胞類似產(chǎn)品：：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞

RA 1細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞

HEK-293 c18細胞類似產(chǎn)品：：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞

U-2OS細胞類似產(chǎn)品：：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞

NRK-49F Cell|大鼠正常腎成纖維細胞

RPTEC TERT1細胞類似產(chǎn)品：：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞

H250細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞

MO59J細胞類似產(chǎn)品：：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞

MV4;11細胞類似產(chǎn)品：：Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、LICR-HN6細胞、PA1細胞

YT細胞類似產(chǎn)品：：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞

Kuramochi細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞

Kuramochi細胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞

HEK-293H細胞類似產(chǎn)品：：SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞

KAT-5細胞類似產(chǎn)品：：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞

U343MG細胞類似產(chǎn)品：：JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞

NCI-SNU-475細胞類似產(chǎn)品：：PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞

HuT 102細胞類似產(chǎn)品：：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞

D407 RPE細胞類似產(chǎn)品：：NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞

WEHI-231細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞

HCT116/L細胞類似產(chǎn)品：：PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞

Tokyo Medical and Dental university 8細胞類似產(chǎn)品：：CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞

A375-S2細胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞

NCI H295R細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞

L細胞類似產(chǎn)品：：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞

Rat Basophilic Leukemia-1細胞類似產(chǎn)品：：Sp2/O-Ag14細胞、PG-LH7細胞、CAL-27細胞

CP-70細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞

B16-F1細胞類似產(chǎn)品：：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞

CHOS細胞類似產(chǎn)品：：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞

WM 2664細胞類似產(chǎn)品：：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞

NCI-SNU-C2A細胞類似產(chǎn)品：：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞

MO59J細胞類似產(chǎn)品：：PIG3細胞、LICR-LON-HN6細胞、TE7細胞

RAG細胞類似產(chǎn)品：：HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞

NS1-Ag4細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞

SW 982細胞類似產(chǎn)品：：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞

NRK-49F Cell|大鼠正常腎成纖維細胞

SCC 4細胞類似產(chǎn)品：：JTC-39細胞、RSC96細胞、Z-138細胞

HDLM2細胞類似產(chǎn)品：：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞

Calu-3細胞類似產(chǎn)品：：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞

F56 [Human neoplasm]細胞類似產(chǎn)品：：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞

NCTC-3960細胞類似產(chǎn)品：：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞

Be-Wo細胞類似產(chǎn)品：：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞

V-79-4細胞類似產(chǎn)品：：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞

NCIH1417細胞類似產(chǎn)品：：SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞

PC14細胞類似產(chǎn)品：：LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞

L5178-R細胞類似產(chǎn)品：：Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞

Tn5 B1-4細胞類似產(chǎn)品：：CORL51細胞、UCLA-RO 81細胞、B-3細胞

RCC-10RGB細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2細胞、HCC0038細胞、NHLF細胞

SMC-1細胞類似產(chǎn)品：：GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞

MCF 7B細胞類似產(chǎn)品：：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞

SNU354細胞類似產(chǎn)品：：NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞

NOZAWA細胞類似產(chǎn)品：：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞

ACC3細胞類似產(chǎn)品：：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞

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