"HFF-1 Cell|人包皮成纖維細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。

細(xì)胞生長：貼壁

FAO-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS 174 T細(xì)胞、CORL23細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞

SUPT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RIN14B細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞

M210B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT-20細(xì)胞、RBE細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞

H-2286細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WERI Rb-1細(xì)胞、H2347細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞

Strain KB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHL-CL-11細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、L-M(TK-)細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HFF-1 Cell|人包皮成纖維細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

ME16C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞

H1688細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞

67NR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞

DB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：５-１：７傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

ME16C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H250細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞

H1688細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞

67NR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞

DB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見的變化，或者通過顯微鏡觀察就可以看見。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

Mono Mac 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD-841CoN細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞

B16 BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞

PC3-M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 611.T細(xì)胞、H-647細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞

Ly8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞

TE-13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat clone A3細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞、NRK細(xì)胞

BMDC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KGN細(xì)胞、AHH-1細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞

EJ 138細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞

Tu 212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞

NU-GC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞

HCC-202細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RT4細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞

HFF-1 Cell|人包皮成纖維細(xì)胞

U266B1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV433細(xì)胞、EO771細(xì)胞、OV1063細(xì)胞

MEG-01細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H165細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞

CV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 1112SK細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞

WEHI164細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMS 13細(xì)胞、BL2141細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞

BMU-S1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caco 2細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞、SW 982細(xì)胞

PC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞

PC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞

IM95細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL279細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、Panc_04_03細(xì)胞

MRC-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞

K1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞

NCI660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：87 MG細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞

HPAF-II/CD18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞

Hs895T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞

MCA-38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞

B16 BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞

BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞

Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞

WM 451-Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞

Melan-a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞

Glioma 261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A431細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞、WM 115細(xì)胞

Hep3B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞

LS411N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞

H-64細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞

GM00637F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞

SW-780細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞

Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-PCa-2b細(xì)胞、HT-22細(xì)胞、293FT細(xì)胞

Panc02細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞

BT 325細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCaP-37細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞

MFE280細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBC1細(xì)胞、MG-63細(xì)胞、BaF3細(xì)胞

HFF-1 Cell|人包皮成纖維細(xì)胞

HCEC-B4G12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞

ACCM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞

HT1080細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞

Hs 888Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞

Strain L-929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞

hTERT-HME-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞

130 T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2106細(xì)胞、3396細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞

NCI-H2107細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞

NCI-H2107細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞

HTR8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞

WSU-DLCL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞

KU 812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞

NCI-H2081細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞

TOV21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1563細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞

201T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞

SuperTube細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1930細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、LM6細(xì)胞

Vx-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞

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