"MGH-U3 Cell|人膀胱癌細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

NCI-H660細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞

NU-GC-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI-460細胞、KASUMI6細胞、SKMEL2細胞

ATDC5細胞類似產(chǎn)品：：L23/P細胞、NCI-H520細胞、Jiyoye (P-2003)細胞

Hs-343-T細胞類似產(chǎn)品：：FL83B細胞、NWA細胞、UPCI-SCC-90細胞

BeWo細胞類似產(chǎn)品：：MC/CAR細胞、A-253細胞、FAT細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MGH-U3 Cell|人膀胱癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

OCI-Ly01細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞

HIT T-15細胞類似產(chǎn)品：：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞

Walker256-TC細胞類似產(chǎn)品：：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞

HBVP細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

OCI-Ly01細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞

HIT T-15細胞類似產(chǎn)品：：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞

Walker256-TC細胞類似產(chǎn)品：：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞

HBVP細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

NCI-H-295細胞類似產(chǎn)品：：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞

MDAMB435S細胞類似產(chǎn)品：：Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞

COLO-684細胞類似產(chǎn)品：：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞

HEK/293細胞類似產(chǎn)品：：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞

DOK細胞類似產(chǎn)品：：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞

CAL39細胞類似產(chǎn)品：：SK-UT-1細胞、RBE細胞、BT-20細胞

FOXNY細胞類似產(chǎn)品：：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞

SACC-83細胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞

NW38細胞類似產(chǎn)品：：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞

Hs 578.Bst細胞類似產(chǎn)品：：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞

MGH-U3 Cell|人膀胱癌細胞

COV 504細胞類似產(chǎn)品：：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞

MFE 296細胞類似產(chǎn)品：：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞

U138MG細胞類似產(chǎn)品：：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞

SY5Y細胞類似產(chǎn)品：：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞

SK-UT-1細胞類似產(chǎn)品：：TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞

MRC-9細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞

MRC-9細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1155細胞、Hep-3B細胞、SNU-C2A細胞

RBMVEC細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞

KMST6細胞類似產(chǎn)品：：MH7A細胞、SUM102PT細胞、NB19-RIKEN細胞

MESSA Dx5細胞類似產(chǎn)品：：PASMCS細胞、CCD19-Lu細胞、U251細胞

OC-316細胞類似產(chǎn)品：：ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞

Hs 888Lu細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細胞、KP2細胞、KYSE70細胞

293/EBNA細胞類似產(chǎn)品：：LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞

H-838細胞類似產(chǎn)品：：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞

CCC-ESF-1細胞類似產(chǎn)品：：H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞

HOS TE85細胞類似產(chǎn)品：：Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞

CPAE細胞類似產(chǎn)品：：OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞

H2286細胞類似產(chǎn)品：：KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞

LM-TK-細胞類似產(chǎn)品：：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞

MKN-74細胞類似產(chǎn)品：：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞

WRL 68細胞類似產(chǎn)品：：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞

RCC-JF細胞類似產(chǎn)品：：HUVEC-C[HUVEC]細胞、T47D細胞、EFM19細胞

JB6 clone 30, subclone 7b細胞類似產(chǎn)品：：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞

NCI-H157細胞類似產(chǎn)品：：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞

NOZ細胞類似產(chǎn)品：：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞

HRA-19細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞

Panc_03_27細胞類似產(chǎn)品：：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞

HFT 8810細胞類似產(chǎn)品：：CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞

OCIAML5細胞類似產(chǎn)品：：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞

MGH-U3 Cell|人膀胱癌細胞

Hs 819.T細胞類似產(chǎn)品：：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞

SKM1細胞類似產(chǎn)品：：QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞

32Dc3細胞類似產(chǎn)品：：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞

MC-4細胞類似產(chǎn)品：：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞

Tca8113細胞類似產(chǎn)品：：Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞

HEK-293細胞類似產(chǎn)品：：Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞

HCC-78細胞類似產(chǎn)品：：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞

A9 (Hamprecht)細胞類似產(chǎn)品：：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞

P3-NS1/1Ag 4.1細胞類似產(chǎn)品：：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞

HNE-3細胞類似產(chǎn)品：：SK ES 01細胞、SK 1細胞、HOS-MNNG細胞

NCI-H1648細胞類似產(chǎn)品：：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞

NCI-H2085細胞類似產(chǎn)品：：L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞

PFSK1細胞類似產(chǎn)品：：DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞

Co320細胞類似產(chǎn)品：：HOMEC細胞、H-508細胞、SU-DHL1細胞

CCD-1112sk細胞類似產(chǎn)品：：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞

H2107細胞類似產(chǎn)品：：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞

Hs 611.T細胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞

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