"SNU-407 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

Clone 15 HL-60細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞

C-26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-878細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞

HAPI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞

H4IIE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1975細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞

H2286細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-929細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SNU-407 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

PC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞

LUDLU-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞

NCIH1618細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞

QGY-7703細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

PC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞

LUDLU-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞

NCIH1618細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞

QGY-7703細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

H2126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞

TGW細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞

NCIH1963細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C1498細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞、ES2細(xì)胞

MUVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞

R-1059-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞

PCI:SG231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞

SH-SY5Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞

U-373-MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞

Hep 3B2_1-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞

COLO 16細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞

SNU-407 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

NCI-H28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nittby-Salford 1細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞、H774細(xì)胞

P3JHR-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞

Panc8.13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞

4T1-LUC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞

COLO-741細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞

OCI-Ly 18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞

A431細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞

2B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞

NCIH2170細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Karpas-422細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞

102PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞

HO8910細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞

RFL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞

RCCJF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞

NTERA2-cloneD1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞

HRPEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞

A375-MEL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞

LCD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞

NIHOVCAR3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞

NCI-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞

CII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞

HFL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞

HLE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞

CCRF CEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO81-1細(xì)胞、MKN 7細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞

VAESBJ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞

NP-69細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-4-II-E細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞

RWPE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞

NCI-UMC-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞

SNU-368細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AML12細(xì)胞、MS 751細(xì)胞、5-8F細(xì)胞

SNU-407 Cell|人結(jié)腸癌細(xì)胞

SUM-52PE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞

PC9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞

Hs 636.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞

OCI AML4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞

OCILY3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞

SUDHL8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞

SuDHL 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞

HANK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞

ROS17/28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞

A-172 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞

NCI-H1694細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞

143B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JVM2細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞

L5178-R細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Karpas-299細(xì)胞、GM3190細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞

NCI-SNU-761細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞

COLO-320-DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞

BCECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC403細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、MDA-MB 468細(xì)胞

CEM-C7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞

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