"HEK293S Cell|人胚腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

IEC18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞

HEK-293A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ECV-304細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、TK-1細(xì)胞

MIHA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞

SF-539 BT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCL1細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞

MDCC-MSB1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RS4:11細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HEK293S Cell|人胚腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

TE4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞

Hs-688A-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞

J774.A1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞

PTK 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

TE4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞

Hs-688A-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞

J774.A1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞

PTK 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

HT55細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞

WPMY-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞

MILE SVEN1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞

OVCA8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03320細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞、hA549細(xì)胞

CD 18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞

MDA-MB 231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞

OVCAR10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U 937細(xì)胞、LS-180細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞

ARPE-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞

GM07404A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞

Neuro2a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞

HEK293S Cell|人胚腎細(xì)胞

DBTRG-05MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBTr細(xì)胞、HB611細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞

RPMI 1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ca Ski細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞、GM637A細(xì)胞

NTERA-2/D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞

MDA-MB 468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U373細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞、ARPE19細(xì)胞

NRK 49F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞

624-mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、aNK細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞

624-mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、aNK細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞

GA-10-Clone-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞

32D:cl3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Farage OL細(xì)胞、LS174細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞

B-95-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-cell細(xì)胞、CAMA細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞

624細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞

AN3 CA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞

Hs940.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞

XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM 2132細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞、R D細(xì)胞

HS-294T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HF-91細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞

U2932細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞

MA-104細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞

PA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Becker細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞

MIHA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞

RD 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SACCLM細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞

LS 180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT-1080細(xì)胞、MODE-K細(xì)胞、H-661細(xì)胞

EU-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞

BV2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞

MDCK (NBL-2)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMS-26細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞

BC-025細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞

NOR10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-387細(xì)胞、SL-29細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞

NCI-H810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞

EB-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞

U-373MG ATCC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞

HEK293S Cell|人胚腎細(xì)胞

UACC 812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞

Tn-5B1-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OSC-19細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞

LICCF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞

H1975細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞

HS-445細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC.3細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞

GM00637F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞

SK UT 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞

GP-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mo7e細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞、LCMS細(xì)胞

Anip973細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞

HSF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞

KAT-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞

MDAMB-231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTCTL140細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞

CHO K1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞

STTG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞

J 774A.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞

DOK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM12878細(xì)胞、Nthy ori 3.1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞

M14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞

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