"NCI-H1781 Cell|人支氣管肺泡腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

CATHa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞

OCI/AML2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BrCL18細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、H520細(xì)胞

UACC-812細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT144-mel細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞

ARH77細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-9細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞

Tca-8113細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MSB-1細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、H1373細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H1781 Cell|人支氣管肺泡腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不HAO），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。

Evsa T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF-539細(xì)胞、U138細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞

OVCA-433細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞

BERH-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞

National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Evsa T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF-539細(xì)胞、U138細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞

OVCA-433細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞

BERH-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞

National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBE 135-E6E7細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SNU449細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞

HSC（Human Schwann）細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞

R 2 C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞

LC-2/ad細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞

PC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nb2細(xì)胞、HOP92細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞

VeroE6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞

HCC0366細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞

SKO3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞

Ca 9-22細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞

EBTr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞

NCI-H1781 Cell|人支氣管肺泡腺癌細(xì)胞

OK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Y3-Ag123細(xì)胞、C-8161細(xì)胞、KU 812細(xì)胞

MESSA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞

293-FT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞

CoCL3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞

207細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞

SH-SY5Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞

SH-SY5Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞

624細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞

H-1688細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞

MES-23.5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞

SNU216細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MyLa 2059細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞、HeLa細(xì)胞

MXI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Earles's cells細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞

HCT 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞

SK-N-BE-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ID8/MOSEC細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞

SGC-7901細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞

NCI H295R細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞

SCC-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2052細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞

NCI-H2135細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞

Lung cancer-1/squamous細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞

UCLA-RO 81細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞

McArdle RH-7777細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WB F344細(xì)胞、786.O細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞

aTC1-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM115mel細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞

PANC-02-03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-293-EBNA細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞、MeWo細(xì)胞

NCI-H2107細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞

Human Liver-7702細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JiyoyeP-2003細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞

639-V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞

ECV 304細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞

GM03569B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1819細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞

OPM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP-N-YN細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞

NCI-H1781 Cell|人支氣管肺泡腺癌細(xì)胞

H4-II-E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞

SK RC 20細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV1-P細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞

L6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞

PANC0403細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-540細(xì)胞、RGE細(xì)胞、A704細(xì)胞

MGH-U1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞

WEHI-231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞

SCCVII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞

WIL2S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞

HCM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞

SK Mel 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 5細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞、SW-579細(xì)胞

P3/X63-Ag8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞

K7M2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03569D細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞

MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞

PLA801-95C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞

Swiss3T3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞

UMUC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞

SK.MEL.28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1770細(xì)胞、U-251細(xì)胞、Z138細(xì)胞

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