"MC3T3 Cell|小鼠前成骨細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

RPTEC/TERT1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PTK-2細(xì)胞、H1819細(xì)胞、NT2細(xì)胞

H250細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VM-CUB1細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、SNU761細(xì)胞

NCI-H2444細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MPC-5細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞

CaEs17細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：X63Ag8-653細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞

Psi-2 DAP細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IOSE80細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞、LS1034細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

MC3T3 Cell|小鼠前成骨細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Adeno-293細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VMRC-LCD細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞、8402細(xì)胞

KTC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞

RKO細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞

M21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Adeno-293細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VMRC-LCD細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞、8402細(xì)胞

KTC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞

RKO細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WM451Lu細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HSC（Human Schwann）細(xì)胞

M21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

PA317細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：R 2 C細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞、H3396細(xì)胞

WM-266-mel細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H2066細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞

HCC-1500細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞

Human podocyte細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：L(TK-)細(xì)胞、ECC12細(xì)胞、Daoy細(xì)胞

EB1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞

HUCCT1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞

DLD-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCC1419細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞、LS1034細(xì)胞

TGW細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞

EMT6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NT-2細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞

LNCaP-FGC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞

MC3T3 Cell|小鼠前成骨細(xì)胞

U138細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞

NBL-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞

NU-GC-3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞

HCC-15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞

GM05887細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞

NCI-H1092細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞

C17.2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U 138 MG細(xì)胞、Eca109細(xì)胞、U266S細(xì)胞

MPP 89細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞

P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞

CWR22Rv1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞

PANC403細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MFM223細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、H-929細(xì)胞

HCC-827細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MCF-7B細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞、SW 527細(xì)胞

RS4:11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞

YAC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞

ME180細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞

MS 751細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞

JeKo-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞

HCC-1143細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞

HCE-2 [50.B1]細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞

T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞

UACC893細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-841細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞

P3-X63-Ag8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞

GM02219C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞

USMC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UT7細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞

NCTC clone 929細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞

WM115F細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WIL2S細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞

HPASMC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW780細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞

LLC-MK2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、PC3細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞

MC3T3 Cell|小鼠前成骨細(xì)胞

H1155細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞

SNU-C2B細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞

H157細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞

Keio University-19-19細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞

SW1783細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞

DMS79細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RBL-1細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞

SKG-IIIa細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞

GalK 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞

FBHE細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞

NG108-15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞

MPVECs細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞

AN3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞

NCIH28細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞

HSC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞

BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞

LAD2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞

SW-954細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞

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