"JCA-1 Cell|人前列腺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

RPMI1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞

Human Kidney-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1975細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞

Walker256-TC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM239細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞

PL-45細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KPNRTBM1細(xì)胞、MN60細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞

H28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TNC-1B12B4細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、159 PT細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

JCA-1 Cell|人前列腺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

RAOEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KNS62細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞、H-1355細(xì)胞

NALM-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞

KNS-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞

BV-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

RAOEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KNS62細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞、H-1355細(xì)胞

NALM-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞

KNS-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞

BV-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

COLO 824細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞

UM-UC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞

BEL-7405細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞

IMCD3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞

RMC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-I細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞、HuT102細(xì)胞

SACC-83細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞

CTV-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、T-98G細(xì)胞、FLS細(xì)胞

CORL23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DoTc2細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞

NE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞

AKR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞

JCA-1 Cell|人前列腺癌細(xì)胞

LM2-4175細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞

M059J細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞

MC3T3-E1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞

KHYG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞

KALS-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RA 1細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞

870細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞

870細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞

CNE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB6Cl30細(xì)胞、SP-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞

UCLA RO-81A-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞

CCLP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞

UCLA SO M21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞

OV-2008細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞

NCI-H1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞

T47-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞

TGW-I-nu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞

H441細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HHL5細(xì)胞、H748細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞

IPLB-SF 21AE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞

H.Ep.-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-886細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、BT-B細(xì)胞

MT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞

LOU-NH-91細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞

SKMEL28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc 05.04細(xì)胞、Pt K1細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞

SKMEL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞

NCI.H522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞

HARAB細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EA. hy 926細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞

MDAMB-231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTCTL140細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞

IHH-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞

Vero 76 clone E-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞

H596細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞

JCA-1 Cell|人前列腺癌細(xì)胞

UMR106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞

C1498細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞

NE-4C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞

MRC-V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞

HB 611細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞

HT(H9)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞

OE-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞

HG2855細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞

Pfeiffer細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞

SKMel-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Line 207細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞、A-498細(xì)胞

BEL-7404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞

293 Ad5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞

HNE-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SP-2細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞

BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞

PC 61細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞

T-47-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BTI-TN5B1-4細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞、KMST6細(xì)胞

MHCC97L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞

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