"PG-4 (S+L-) Cell|貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

SK-HEP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞

HEL-92細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 737.T細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、SW 48細(xì)胞

CL-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞

DI TNC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2172細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞

BC-021細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE-520細(xì)胞、H2171細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

PG-4 (S+L-) Cell|貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

SNU-886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞

B16-F10-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞

Swiss 3T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞

T1-73細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

SNU-886細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞

B16-F10-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞

Swiss 3T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞

T1-73細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞傳代比例：對(duì)于有限細(xì)胞系，傳代時(shí)以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細(xì)胞密度，計(jì)算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對(duì)應(yīng)1次倍增，4對(duì)應(yīng)2次倍增，8對(duì)應(yīng)3次倍增，16對(duì)應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達(dá)到原來相同的細(xì)胞密度。脆弱的或生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞系通常一傳二，而有活力的，生長(zhǎng)快速的細(xì)胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細(xì)胞系可一傳五十或一傳100。一旦細(xì)胞系變?yōu)檫B續(xù)細(xì)胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細(xì)胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間。可選擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時(shí)要保證：細(xì)胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時(shí)以內(nèi))，可重新進(jìn)入生長(zhǎng)周期；而且在下次傳代前不進(jìn)人平臺(tái)期。

MDA.MB.231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞

Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caco-2BBe細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞、H157細(xì)胞

Capan-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞

GL261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞

MPVECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞

Y3M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞

RKOE6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞

3T3(A31)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞

J-774A.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM-CCRF細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞

OLN 93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Co320細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞

PG-4 (S+L-) Cell|貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞

MPP89細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HNEpC細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞

H-1404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞

NCIH847細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞

CT 26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞

SK BR 03細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞

H-2135細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞

H-2135細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ROS17/28細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞

NCIH522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞

Ketr-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞

SK-MEL-2-LUC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞

PK136細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFS60細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞、Institute for Medical Research-90細(xì)胞

FaDu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞

SC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DU145細(xì)胞、HT 115細(xì)胞、H87細(xì)胞

VMRC-RCZ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-839細(xì)胞、H-358細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞

U 138 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞

McA-RH 7777細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H157細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞

BAC1.2F5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞

C4 I細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞

P3-X63.Ag8.653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞

NPA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞

Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW756細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞

HT 29細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞

LNCaP-FGC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞

HEC-1-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WSU-DLCL2細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞

NCI-H2066細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞

NBL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPC-039細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞

H1954細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞

WI 38細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞

Rat Fetal Lung-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞

PG-4 (S+L-) Cell|貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞

BE2-C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞

H508細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞

P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞

HeLa/S3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞

Tu-212細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-475細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞、V79-4細(xì)胞

IHHA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞

SW1353細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GP293細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、CAL-51細(xì)胞

MDST8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞

CMT 93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞

HEK293-A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞

CHL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞

NCI N87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MGC-803細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞

HCCC9810細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 840.T細(xì)胞、MEL細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞

3AO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞

HCT FET細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞

MNNGHOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞

SNU-C1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞

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