"SUP-M2 Cell|人間變性大細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲(chóng)的污染情況總結(jié)】原蟲(chóng)：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站YOU勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

BIC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞

Line 697細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HUT 226細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞

102PT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KMH2細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、SW 480細(xì)胞

COV 504細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HGBEC細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、OE21細(xì)胞

NCIH2107細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUPB15細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

SUP-M2 Cell|人間變性大細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶(hù)遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

THP-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞

K562/ADR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞

Ly10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞

SUM52PE細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

THP-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞

K562/ADR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞

Ly10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞

SUM52PE細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

H1954細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞

V-79-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞

H-187細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞

Douglas Foster-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞

BL-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞

ES2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI AML5細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞

HFF-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞

U-266細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞

NL20細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RIN m5F細(xì)胞、MLFC細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞

HT 1080細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KG1A細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞

SUP-M2 Cell|人間變性大細(xì)胞

BV173細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞

H3396細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞

COLO-738細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞、GM05862細(xì)胞

LN 382細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞

PaTu-8988s細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞

HBEpiC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RWPE-2細(xì)胞、SKO3細(xì)胞、GM03571細(xì)胞

MV 3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞

SW1573細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JEKO細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞

751-NA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EFO27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞、138MG細(xì)胞

A431/P細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞

HFF細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞

3T3 L1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NL20SV細(xì)胞、IEC6細(xì)胞、NALM 6細(xì)胞

786.O細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH2347細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞

JROECL 33細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞

NRK clone 49F細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H322T細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞、OE21細(xì)胞

Kasumi-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH1623細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞

LIM 1215細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞

PANC 327細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A375SM細(xì)胞、RL-95-2細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞

A2780 CP70細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞

F81細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞

RPMI 7666細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞

Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞

H-647細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞

P-36細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞

H-2228細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞

HCa/16A3-F細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SHEP1細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞、RA.1細(xì)胞

C4I細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞

Hep II細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH1581細(xì)胞、Anglne細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞

SUP-M2 Cell|人間變性大細(xì)胞

CW2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞

JCA-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞

HSAEC1-KT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW-403細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞、H-1623細(xì)胞

H-1944細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞

SK-Mel 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞

IAR 20細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞

MESSA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞

Hs-274-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞

rRTEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞

HeLa-S3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞、SW 579細(xì)胞

UWB1.289+BRCA1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞

MCF 10A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-Ly01細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞

8402細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VMCUB1細(xì)胞、BMDC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞

RBE4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞

GP2d細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CCD19Lu細(xì)胞、GM2131細(xì)胞、GM637細(xì)胞

JB6 [Mouse]細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞

H-2591細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞

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