"BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。

細(xì)胞生長：貼壁

SK-RC-39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞

P-388D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV1063細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、TE-4細(xì)胞

UPCI-SCC-154細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-28/I2細(xì)胞、H-727細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞

Mono Mac6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：138 MG細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞

TE-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H2106細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時(shí)間過長或過短：時(shí)間過長，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Hs 888.Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞

HuT 78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞

ZR-75-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞

H650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

Hs 888.Lu細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞

HuT 78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞

ZR-75-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-522細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞

H650細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

Functional Liver Cell-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞

SGC 7901細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞

LK 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞

ROS17/28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞

H4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞

2BS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞

Walker-Ca.256細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞

Walker-256細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞

H-446細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞

MNNG-HOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞

BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細(xì)胞

SMA-560細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞

B16/F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞

COLO 741細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞

L cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C38細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞

LCD細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞

YES-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H889細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞

YES-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H889細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞

EFM-192B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞

LTEPa2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞

SNT-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞

Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞

OCILY10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLF-a細(xì)胞、RSMC細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞

MC 3T3-E1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞

BC3 H1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞

RBSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP-C4-2細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞

MeT-5A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞

FTC-133細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞

DKMG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞

D324 Med細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFL細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞

A549/DDP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞

KYSE-150細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞

B16 BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞

P30-OHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞

H23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞

OVCAR-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞

D-324 Med細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-182細(xì)胞、HCT-116細(xì)胞、H2066細(xì)胞

SJ-RH30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞

CHO Lec1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caco-2/BBe細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、A375S2細(xì)胞

PLC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞

BS-C-1 Cell|非洲綠猴腎細(xì)胞

NIH:OVCAR4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ly8細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞

My-La 2059細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞

COLO320HSR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞

RCS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A375細(xì)胞、GM17219細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞

T24細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞

SW 900細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞

LA795細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞

HIT T15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞

HIT T15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞

KYSE 180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞

CHO K1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 78細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞

KAT-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞

MN-60細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Wien133細(xì)胞、H-838細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞

T241細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞

OV3121細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞

CAL 51細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞

Y3-Ag1.2.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞

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