"108CC15 Cell|小鼠神經(jīng)母瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞Zui大的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會(huì)長的慢，買個(gè)支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個(gè)人衛(wèi)生。

細(xì)胞生長：貼壁

MHCC97-L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞

SHSY5Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1666細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、CTV1細(xì)胞

AM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFLS-RA細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、REC細(xì)胞

NCIH716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03573A細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、LAN6細(xì)胞

NS1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1238細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

108CC15 Cell|小鼠神經(jīng)母瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

RPMI-1846細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞

ANA1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-127細(xì)胞、KBM7細(xì)胞、H-2081細(xì)胞

RCC-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞

AZ-521細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

RPMI-1846細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞

ANA1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-127細(xì)胞、KBM7細(xì)胞、H-2081細(xì)胞

RCC-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞

AZ-521細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

MS 751細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA5細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞

NCI-H1838細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞

HB 611細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI #1846細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞、H2405細(xì)胞

LMH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞

UT7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MEG01細(xì)胞、TE-671細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞

TR-146細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-231細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、CHO細(xì)胞

THC-8307細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞

BNL CL.2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TF1細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞

RMa-bm細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT26WT細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞、HCC2218細(xì)胞

Line 697細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT 226細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞

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S3 HeLa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞

BL-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞

BC3H-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞

HNTEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞

KTC1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞

U-138 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞

U-138 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞

COLO 394細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞

KTA7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NuTu-19細(xì)胞、M07e細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞

MADB106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JEG3細(xì)胞、SUM159PT細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞

NS1-Ag4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2196細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-626細(xì)胞

CHO-K1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞

SCLC21H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCM-1A細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞

DanG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞

Jiyoye細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞

V79-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAN5細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞

CAL 62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTC200細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞

RCC-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞

UMR106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞

T-HSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-119細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、ROS17/2.8細(xì)胞

MES 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞

C32-mel細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GLAG-66細(xì)胞、huH 1細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞

CTLL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞

OVCAR.3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞

H69/P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞

HOS TE85細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞

mIMCD-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞

NCIADR.RES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUNE 1細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞、3LL細(xì)胞

WM266-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞

108CC15 Cell|小鼠神經(jīng)母瘤與大鼠膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞

KU812-F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：639V細(xì)胞、B35細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞

Hepa-RG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞

Panc 3.27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞

USMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UT7細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞

CORL279細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞

143TK-細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞

CATH.a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞

MDAMB436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞

MDAMB436細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞

C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞

NCIH1703細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞

TO175T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞

NIH:OVCAR-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HTori:3細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞

SKBR-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞

HEL-92細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞

NCI-ADR-RES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞、WEHI164細(xì)胞

HCC-1599細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B/C3T3細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞

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