"FET Cell|人結腸癌細胞

細胞背景資料：結腸癌

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當消化液濃度過GAO時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

MCF10A細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞

SP2細胞類似產(chǎn)品：：CCD1095Sk細胞、Bac12F5細胞、HT 144細胞

Japanese Tissue Culture-39細胞類似產(chǎn)品：：HCT-8細胞、H3255細胞、CATH.a細胞

Y3Ag1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：SKLMS1細胞、GM03671細胞、SKNBE2細胞

Reuber-H-35 hepatoma細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92細胞、MyLa 2059細胞、KM12-SM細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

FET Cell|人結腸癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因導入細胞內(nèi)，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞GAO出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到Zui低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良HAO的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。

BEL-7404細胞類似產(chǎn)品：：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞

U118-MG細胞類似產(chǎn)品：：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞

Strain L-929細胞類似產(chǎn)品：：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞

KP-N-NS細胞類似產(chǎn)品：：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

BEL-7404細胞類似產(chǎn)品：：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞

U118-MG細胞類似產(chǎn)品：：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞

Strain L-929細胞類似產(chǎn)品：：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞

KP-N-NS細胞類似產(chǎn)品：：CV 1細胞、NTERA-2cl.D1細胞、OVCAR420細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質干細胞和其他一些細胞。

H211細胞類似產(chǎn)品：：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞

SNUC2A細胞類似產(chǎn)品：：A 549細胞、Panc_02_03細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞

Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞

WC00044細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞

ES2細胞類似產(chǎn)品：：OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞

OCI/AML-5細胞類似產(chǎn)品：：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞

SAS細胞類似產(chǎn)品：：GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞

H-520細胞類似產(chǎn)品：：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞

NCI-H524細胞類似產(chǎn)品：：DHL8細胞、IMR32細胞、UPCI-SCC090細胞

H-1436細胞類似產(chǎn)品：：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞

FET Cell|人結腸癌細胞

VMM5細胞類似產(chǎn)品：：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞

H-526細胞類似產(chǎn)品：：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞

MGHU1細胞類似產(chǎn)品：：WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞

MIA PaCa-2細胞類似產(chǎn)品：：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞

UMRC2細胞類似產(chǎn)品：：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞

H-716細胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞

H-716細胞類似產(chǎn)品：：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞

A2780/Taxol細胞類似產(chǎn)品：：RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞

H378細胞類似產(chǎn)品：：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞

Calu3細胞類似產(chǎn)品：：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞

RLE-6TN細胞類似產(chǎn)品：：C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞

MeSoTheliOma-211H細胞類似產(chǎn)品：：BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞

TNC-1B12B4細胞類似產(chǎn)品：：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞

Panc 2.03細胞類似產(chǎn)品：：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞

HOS-MNNG細胞類似產(chǎn)品：：GB1細胞、HUC細胞、H187細胞

H-660細胞類似產(chǎn)品：：P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞

D-324 Med細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞

P3 NS1 Ag4/1細胞類似產(chǎn)品：：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞

PBMC細胞類似產(chǎn)品：：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞

CP70細胞類似產(chǎn)品：：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞

NK-92.05細胞類似產(chǎn)品：：32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞

COR-L105細胞類似產(chǎn)品：：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞

VK-2/E6E7細胞類似產(chǎn)品：：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞

SK-RC 42細胞類似產(chǎn)品：：SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞

HR-8348細胞類似產(chǎn)品：：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞

PC3M-2B4細胞類似產(chǎn)品：：COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞

5-8F細胞類似產(chǎn)品：：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞

NCIH2085細胞類似產(chǎn)品：：Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞

SK-Hep1細胞類似產(chǎn)品：：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞

FET Cell|人結腸癌細胞

DoTc2細胞類似產(chǎn)品：：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞

TE 85 ClF-5細胞類似產(chǎn)品：：IGROV細胞、Neuro 2a細胞、NCI-SNU-886細胞

National Medical Center-Glioma 1細胞類似產(chǎn)品：：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞

HPMEC細胞類似產(chǎn)品：：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞

P388-D1細胞類似產(chǎn)品：：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞

COLO 699細胞類似產(chǎn)品：：TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞

H1618細胞類似產(chǎn)品：：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞

R D細胞類似產(chǎn)品：：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞

AHH-1細胞類似產(chǎn)品：：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞

TE-10細胞類似產(chǎn)品：：NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞

NT-2細胞類似產(chǎn)品：：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞

E304細胞類似產(chǎn)品：：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞

CMT 167細胞類似產(chǎn)品：：LLC-PK(1)細胞、VERO76細胞、RL95-2細胞

A2780CP70細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞

TE353.SK細胞類似產(chǎn)品：：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞

CHO-ori細胞類似產(chǎn)品：：FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞

NTera2/D1細胞類似產(chǎn)品：：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞

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