"MV-522 Cell|人肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：肺腺癌；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

Lu99A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞

M20 [Human melanoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WM115細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞

NS653細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1869細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞

H1836細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1581細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、NHLF細(xì)胞

SK-MEL3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Embryo Lung-1細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

MV-522 Cell|人肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開(kāi)啟超凈臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于氣流的流通。實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開(kāi)的容器瓶口正上方操作，容器打開(kāi)后，傾斜45°操作，操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤(pán)2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外燈照射4h以上。水盤(pán)內(nèi)加入無(wú)菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺(tái)過(guò)濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。

C33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞

CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞

RenCa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞

FHL124細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

C33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞

CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞

RenCa細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞

FHL124細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

HCC0202細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞

MDA-MB415細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞

Panc02-H0細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞

Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞

SW839細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞

OV3121細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞

PC-9S1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TK 10細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞

NCIH196細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞

PT-67細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞

IOSE29細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞

MV-522 Cell|人肺癌細(xì)胞

A-172 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞

HTori-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LM6細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞、MUG-Chor1細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞

B16/F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞

OE33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞

B16F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞

B16F1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞

H4-II-E細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞

DHL10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1793細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞

RPMI1846細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞

MM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV 4;11細(xì)胞、Tregs細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞

COLO-357細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞

NCI-H2030細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞

10T1/2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞

MFC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3-L1細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞

NH-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞

H-711細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞

PLC-PRF-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH345細(xì)胞、DU 4475細(xì)胞、207細(xì)胞

MC-CAR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞

HuH-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH:OVCAR-8細(xì)胞、DHL10細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞

rUCMSCs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK.EBNA細(xì)胞、SB細(xì)胞、ME16C細(xì)胞

NS1-Ag4/1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞

WiDrTC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-251細(xì)胞、H-1954細(xì)胞、CHO-K1細(xì)胞

RetroPack PT67細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞

H-920細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞

SaOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EA.Hy926細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞

HUVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1436細(xì)胞、H2081細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞

JVM3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞

3396細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞

MV-522 Cell|人肺癌細(xì)胞

MCF7-GFP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/NS-1細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞

HGC-27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞

KMS-18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞

KY-50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞

Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞

OVCAR420細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞

HCE-2 [50.B1]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞

H-35細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KP 4細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、BSC1細(xì)胞

C-643細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞

KTCTL-140細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞

NK-92 MI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2291細(xì)胞、GP293細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞

RDES-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞

MDA-MB-435-S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞

EB1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞

TSUpr1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞

QBI-HEK 293A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EU-2細(xì)胞、MN9D細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞

EBNA293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞

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