"NCI-H250 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：小細(xì)胞肺癌；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NCI H82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SP2/0 Ag-14細(xì)胞、SNU668細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞

Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JCA-1細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞

GA-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIH3T3-L1細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞

NCIH23細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mIMCD-3細(xì)胞、RL細(xì)胞、H64細(xì)胞

ZR75-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NFHIOSE-80細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、B78細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

NCI-H250 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞

L929(NCTC)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞

L 1210細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞

PLC-8024細(xì)胞類似產(chǎn)品：：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞

L929(NCTC)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C-26細(xì)胞、GP-293細(xì)胞、AHH1細(xì)胞

L 1210細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞

PLC-8024細(xì)胞類似產(chǎn)品：：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：半貼壁

細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。 也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）、無限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）），因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（定環(huán)境下口語和書面語都使用），廣義是指可傳代的細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。國(guó)際上美、英和日本等國(guó)已建有細(xì)胞庫；美國(guó)已有美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫或細(xì)胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細(xì)胞庫（HGMR）、細(xì)胞衰老細(xì)胞庫（CAR）等，其中ATCC不僅是美國(guó)也世界大的細(xì)胞庫。細(xì)胞系建立要求：什么樣的體外培養(yǎng)群可被認(rèn)可為己鑒定的細(xì)胞，視具體情況而定，無統(tǒng)一規(guī)定。對(duì)于用作原代培養(yǎng)的細(xì)胞只要供體均一，取材部位及組織種類等條件穩(wěn)定即可，如用做長(zhǎng)期培養(yǎng)，別是反復(fù)傳代的細(xì)胞，常需做如下說明：組織來源：細(xì)胞供體所屬物種，來自人體或者動(dòng)物；個(gè)體性別、年齡；取材的器官或組織。如系腫瘤組織，應(yīng)說明臨床和病理診斷，以及病歷號(hào)等。細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)：了解細(xì)胞一般和殊的生物學(xué)性狀，如細(xì)胞一般形態(tài)，異結(jié)構(gòu)，細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和分裂指數(shù)，倍增時(shí)間，接種率等。如為腫瘤細(xì)胞，為說明來源于原腫瘤組織并保持惡性，須做軟瓊脂培養(yǎng)，異體接種致瘤和對(duì)正常組織侵潤(rùn)力等實(shí)驗(yàn)。培養(yǎng)條件和方法；應(yīng)說明細(xì)胞系（或株）適應(yīng)的生存環(huán)境，即指明使用的培養(yǎng)基、血清種類、用量以及適宜PH值。

HO8910細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞

MHCC 97-H細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞

MJ細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RN細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞

NCI H548細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC 38細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞

Hs 578.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OUMS-23細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞、UMUC-14細(xì)胞

IOSE-Mar細(xì)胞類似產(chǎn)品：：4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞

SV40 MES 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DITNC1細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞

HS688AT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞

HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞

LN 382細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞

NCI-H250 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

MKN1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞

SW480細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞

SKCO-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞

H838細(xì)胞類似產(chǎn)品：：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞

SEM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞

PK (15)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞

PK (15)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞

Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NP69SV40T細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞

FRTL 5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞

HEK-293F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞

BC-PAP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞

MIHA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCS-2/8細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞

RM-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞

HCC-1171細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF-10A細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞

NCIH209細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞

0V-1063細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780S細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞、JB 6細(xì)胞

H69/P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞

AHH-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞

B16-BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞

CT26.WT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞

NB-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞

P3J-HR-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞

UM-UC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞

PE/CA-PJ34細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HIT-T15細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞、Hce8693細(xì)胞

H865細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK 293FT細(xì)胞、B16F0細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞

NB-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞

NL20SV細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞

NBL-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞

Molm14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞

NCI-H250 Cell|人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

D341細(xì)胞類似產(chǎn)品：：hFOB1.19細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞

UMRC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D/cl3細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞

293/EBNA-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK_N_FI細(xì)胞、Ly3細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞

HT3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞

GNM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞

HCS2/8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞

SF 539細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞

G361細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞

HC-11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hca-F細(xì)胞、BT-483細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞

HVSMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞

SUDHL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GC-1 spg細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞

Lu99A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞

FHL124細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GCT0404細(xì)胞、MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞

JB6 Cl 30-7b細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞

RK 13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH2405細(xì)胞、HNE3細(xì)胞、SNU601細(xì)胞

R.K.13細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-134-VI細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞

Human Embryo Kidney-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞

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