"DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲(chóng)的污染情況總結(jié)】原蟲(chóng)：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站YOU勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問(wèn)題、操作問(wèn)題、環(huán)境問(wèn)題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問(wèn)題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

A-10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞

ATN1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NOR 10細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞

Rat-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KMS18細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞

BT-325細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU601細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞

LSC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：D341細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶(hù)遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

PANC0203細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞

PAMC82細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞

LS 174T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞

KYSE180細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

PANC0203細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞

PAMC82細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：mousepodocyte細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞

LS 174T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞

KYSE180細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來(lái)自嚙齒類(lèi)或來(lái)自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來(lái)，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過(guò)程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

TOV112細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞

MALME 3M細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A204細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞

MGH-U1 (EJ)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞、H1436細(xì)胞

HIT-T15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞

HARA-B細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HUCCT1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞

SUP-B1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞

Ly10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞

SNU-C2B細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞

Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞

MT-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HPAC細(xì)胞、PANC0813細(xì)胞、BBE細(xì)胞

DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

JKT1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hi-5細(xì)胞、PC3M-1E8細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞

GM00637H細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞

H2081細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：hFOB細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞、CP70細(xì)胞

Hs 888Lu細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞

L cells (TK-)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞

RPVSMC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞

RPVSMC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUM-149細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞

786-0WT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞

ONS76細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞

Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞

VCaP細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞

IOSE-Mar細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞

COLO 320DM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞

MCF-7/ADR細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞

MH-22a細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞

OE21細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H508細(xì)胞、ECV304細(xì)胞、H64細(xì)胞

NCI-SNU-216細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞

Onda 11細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞

Panc08.13細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞

NCI-H1869細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LS-1034細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞

H841細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞

JG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SCC9細(xì)胞、High5細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞

Pt K1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Ly18細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞、H2452細(xì)胞

H-1915細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：S180細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞

PLMVEC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞

D6P2T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞

OCI Ly19細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞

HFF-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞

HLEC-B3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MOLT 16細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞

DK-MG Cell|人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

HEK 293-EBNA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞

Hs 578T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-N-AS細(xì)胞、F98細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞

A375-SM細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞

RASMCs細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞

SW 1417細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OB2細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞、U-2 OS細(xì)胞

Mono Mac6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞

SK-LMS-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞

Beta-TC-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞

Beta-TC-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞

OCIAML3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞

MHCC-LM3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞

ARH-77細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞

MM-1S細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞

SNU5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞

NCI-H1437細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞

HBZY-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞

PG-4(S+L-)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞

"