"KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細胞

細胞背景資料：食管鱗癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

NR8383.1細胞類似產(chǎn)品：：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞

Panc 02細胞類似產(chǎn)品：：T47-D細胞、A-375.S2細胞、P3X63NS1細胞

PIEC細胞類似產(chǎn)品：：SK-SH-SY5Y細胞、EFM-192B細胞、NCI-H2108細胞

U-hth74細胞類似產(chǎn)品：：MEL-526細胞、hFOB細胞、HEL-1細胞

H1650細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat E6.1細胞、NCI522細胞、HEB細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Pro-5WgaRI3C細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞

KYSE 70細胞類似產(chǎn)品：：REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞

CHO-Lec1細胞類似產(chǎn)品：：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞

A2780/CP細胞類似產(chǎn)品：：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Pro-5WgaRI3C細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞

KYSE 70細胞類似產(chǎn)品：：REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞

CHO-Lec1細胞類似產(chǎn)品：：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞

A2780/CP細胞類似產(chǎn)品：：HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞傳代比例：對于有限細胞系，傳代時以二、四、八或十六倍(傳代比率分別是2、4、8和16)降低細胞密度，計算群體倍增數(shù)更容易(即分別是傳代比率2對應(yīng)1次倍增，4對應(yīng)2次倍增，8對應(yīng)3次倍增，16對應(yīng)4次倍增)；例如，一傳八的培養(yǎng)物需要3次倍增才能達到原來相同的細胞密度。脆弱的或生長緩慢的細胞系通常一傳二，而有活力的，生長快速的細胞系可以一傳八，甚至一傳十六。有些連續(xù)細胞系可一傳五十或一傳100。一旦細胞系變?yōu)檫B續(xù)細胞系(通常經(jīng)過150次或200次倍增以上)，細胞濃度是主要參數(shù)，培養(yǎng)濃度應(yīng)降至10(4)/ml--10(5)/ml之間。可選擇傳代間隔合適的傳代比率或稀釋度，或許為1周或2周，同時要保證：細胞密度不可稀釋過低，使其延遲期合理(在24小時以內(nèi))，可重新進入生長周期；而且在下次傳代前不進人平臺期。

RPMI-1788細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞

MMAc.SF細胞類似產(chǎn)品：：PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞

Spodoptera frugiperda clone 9細胞類似產(chǎn)品：：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞

I90細胞類似產(chǎn)品：：MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞

SKNBE(2)細胞類似產(chǎn)品：：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞

FTC-133細胞類似產(chǎn)品：：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞

P3HR-1細胞類似產(chǎn)品：：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞

Rat 2細胞類似產(chǎn)品：：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞

MDCK-2細胞類似產(chǎn)品：：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞

MADB106細胞類似產(chǎn)品：：JEG3細胞、SUM159PT細胞、Hs604T細胞

KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細胞

HDLM2細胞類似產(chǎn)品：：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞

U-hth74細胞類似產(chǎn)品：：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞

Anip-973細胞類似產(chǎn)品：：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞

KYSE30細胞類似產(chǎn)品：：MCF7/WT細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、HCA7細胞

RS 4;11細胞類似產(chǎn)品：：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞

GM05384細胞類似產(chǎn)品：：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞

GM05384細胞類似產(chǎn)品：：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞

UPCI-SCC-090細胞類似產(chǎn)品：：U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞

Hs819T細胞類似產(chǎn)品：：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞

Oregon J-111細胞類似產(chǎn)品：：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞

MDA436細胞類似產(chǎn)品：：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞

H-748細胞類似產(chǎn)品：：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞

Henrietta Lacks cells細胞類似產(chǎn)品：：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞

MBT2細胞類似產(chǎn)品：：PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞

NCIH1930細胞類似產(chǎn)品：：Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞

GM17219細胞類似產(chǎn)品：：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞

SUDHL1細胞類似產(chǎn)品：：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞

U-343細胞類似產(chǎn)品：：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞

1.1B4細胞類似產(chǎn)品：：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞

CMT-93細胞類似產(chǎn)品：：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞

H1618細胞類似產(chǎn)品：：TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞

A2008細胞類似產(chǎn)品：：OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞

TM4細胞類似產(chǎn)品：：UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞

HCA7細胞類似產(chǎn)品：：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞

SUM-102PT細胞類似產(chǎn)品：：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞

QGP1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞

H1395細胞類似產(chǎn)品：：MIO-M1細胞、Hs840_T細胞、Caco2BBe細胞

GT1-1細胞類似產(chǎn)品：：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞

LA-N-5細胞類似產(chǎn)品：：Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞

KYSE-50 Cell|低分化人食管鱗癌細胞

C643細胞類似產(chǎn)品：：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞

RCC_7860細胞類似產(chǎn)品：：U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞

AtT20細胞類似產(chǎn)品：：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞

COLO 679細胞類似產(chǎn)品：：CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞

Pfeiffer細胞類似產(chǎn)品：：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞

H929細胞類似產(chǎn)品：：639 V細胞、VK-2/E6E7細胞、NOK細胞

H2052細胞類似產(chǎn)品：：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞

HepG2細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞

A-101D細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞

SK-UT-1細胞類似產(chǎn)品：：TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞

TGW-nu-1細胞類似產(chǎn)品：：Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞

3T3NIH細胞類似產(chǎn)品：：LX-2細胞、HCC1395細胞、OV1-P細胞

M-1細胞類似產(chǎn)品：：HEEpiC細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、RPMI7951細胞

Mv 1 Lu (NBL-7)細胞類似產(chǎn)品：：BCaP 37細胞、H-1944細胞、NCI-UMC-11細胞

HTori-3.1細胞類似產(chǎn)品：：BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞

211H細胞類似產(chǎn)品：：Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞

H747細胞類似產(chǎn)品：：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞

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