"CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：軟骨肉瘤；男性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

S37細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞

KBM-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BPH-1細(xì)胞、TOV112細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞

NCI-H1573細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD19-Lu細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、SF763細(xì)胞

Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GH3細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、H2198細(xì)胞

C2BBe1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F10--RED細(xì)胞、RL95細(xì)胞、BL6細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

HT 1376.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞

RS 4;11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞

hUC-MSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞

MES-SA-Dx5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

HT 1376.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U138細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞

RS 4;11細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MPC5細(xì)胞、H-1404細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞

hUC-MSC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞

MES-SA-Dx5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

HCa/16A3-F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHEP1細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞、RA.1細(xì)胞

RERF-LC-MS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NH6細(xì)胞、H-211細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞

PANC1005細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2198細(xì)胞、N-87細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞

U343細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞

hTERT-RPE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPA'87細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞

OVCAR 8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCRF-CEM/S細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞、JIMT細(xì)胞

UMUC-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞

RWPE2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞

HCC-1833細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞

HuH-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞

CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細(xì)胞

Hs 695T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L-6細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞

MS-751細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞

Sp 2817細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞

D6P2T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞

BT-474細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞

FU-MMT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞

FU-MMT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞

293-EBNA1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞

Keio University-19-19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF539細(xì)胞、RPMI no 8226細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞

Liver-02細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC-4細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞

AG 9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos-RA1細(xì)胞、IAR20細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞

NT2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞

ARO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞

NCI-H2108細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞

LA-N-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞

Panc-327細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCEC-12細(xì)胞、SN12C細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞

Madison lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞

NCI-SNU-449細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞

EFM-192B細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞

251 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：2BS細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞

H510細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-1細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞

H-522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞

H-2170細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WILL-2細(xì)胞、Y-79細(xì)胞、RN-c細(xì)胞

MV411細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞

mRTEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞

MGECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKBR-3細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞

UMUC14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞

LLCMK2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L615細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞

PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞

CAL-78 Cell|人軟骨肉瘤細(xì)胞

CNE-2Z細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞

PZ-HPV-7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞

MRC5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞

H-920細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞

NCIH3255細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EAhy 926細(xì)胞、A-375細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞

UCLA RO-81-A-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 EBNA細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞

WM-239細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞

Hs 934.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞

HUCEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKO細(xì)胞、SUD-4細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞

P30/Ohkubo細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞

SRA01/04 (HLE)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞

A-101D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞

NCI-H660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞

H-719細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Caki2細(xì)胞、H1155細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞

SK-MEL2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞

NCIH244細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LIPF155C細(xì)胞、MF2059細(xì)胞、EJ細(xì)胞

SCC15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞

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