"OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞

細胞背景資料：葡萄膜黑色素瘤；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

IBRS2細胞類似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞

OCI/AML-3細胞類似產(chǎn)品：：MDST8細胞、H-1993細胞、P-3J細胞

GC-1細胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney-52E細胞、HSF2細胞、HS 445T細胞

JROECL 33細胞類似產(chǎn)品：：HOCF細胞、Panc 5.04細胞、TE-85細胞

FDCP-1細胞類似產(chǎn)品：：SV40-HCEC細胞、COLO 320F細胞、CAL 148細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

NCI H226細胞類似產(chǎn)品：：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞

Hs821T細胞類似產(chǎn)品：：ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞

HEK 293 c18細胞類似產(chǎn)品：：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞

H4-II-EC3細胞類似產(chǎn)品：：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

NCI H226細胞類似產(chǎn)品：：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞

Hs821T細胞類似產(chǎn)品：：ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞

HEK 293 c18細胞類似產(chǎn)品：：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞

H4-II-EC3細胞類似產(chǎn)品：：SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

H548細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞

LWnt-3A細胞類似產(chǎn)品：：A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞

CNLMG-B5537SKIN細胞類似產(chǎn)品：：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞

DMS273細胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞

NCIH345細胞類似產(chǎn)品：：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞

GM3569細胞類似產(chǎn)品：：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞

KRC Y細胞類似產(chǎn)品：：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞

T173細胞類似產(chǎn)品：：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞

U251細胞類似產(chǎn)品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞

LC-MS細胞類似產(chǎn)品：：NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞

OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞

Lu99A細胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細胞、Renal Carcinoma細胞、MBT2細胞

L-132細胞類似產(chǎn)品：：CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞

H2126細胞類似產(chǎn)品：：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞

COR-L23/P細胞類似產(chǎn)品：：RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞

TFH細胞類似產(chǎn)品：：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞

MDA MB 175 VII細胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞

MDA MB 175 VII細胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞

CHP-100細胞類似產(chǎn)品：：PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞

HS-294-T細胞類似產(chǎn)品：：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞

MOLT.4細胞類似產(chǎn)品：：H295細胞、A2780S細胞、DCS細胞

CTX TNA2細胞類似產(chǎn)品：：JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞

ONS76細胞類似產(chǎn)品：：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞

CCF-STTG1細胞類似產(chǎn)品：：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞

Hi-five細胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞

GM2132細胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞

T-CAM2細胞類似產(chǎn)品：：SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞

A2780CP70細胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞

TSU-Pr1細胞類似產(chǎn)品：：H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞

H-508細胞類似產(chǎn)品：：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞

PG-4(S+L-)細胞類似產(chǎn)品：：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞

QGY細胞類似產(chǎn)品：：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞

SN12C細胞類似產(chǎn)品：：H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞

Clone Y1細胞類似產(chǎn)品：：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞

Jiyoye(P-2003)細胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞

SW1116細胞類似產(chǎn)品：：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞

WM 2664細胞類似產(chǎn)品：：TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞

NCI-N87細胞類似產(chǎn)品：：NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞

HRCEC細胞類似產(chǎn)品：：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞

HFL1細胞類似產(chǎn)品：：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞

OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞

HCC202細胞類似產(chǎn)品：：NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞

COLO-320DM細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞

OCILY3細胞類似產(chǎn)品：：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞

SJRH 30細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞

IHC-ST1細胞類似產(chǎn)品：：Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞

A-172 MG細胞類似產(chǎn)品：：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞

253J-Bladder-V細胞類似產(chǎn)品：：LA 4細胞、KMST-6細胞、PAI細胞

293S細胞類似產(chǎn)品：：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞

HT1376細胞類似產(chǎn)品：：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞

NIHOVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞

MES-SA/Dx5細胞類似產(chǎn)品：：Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞

NHRF細胞類似產(chǎn)品：：D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞

Tadarida brasiliensis 1 lung細胞類似產(chǎn)品：：JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞

MDA-468細胞類似產(chǎn)品：：HOC-1細胞、SO-Rb 50細胞、TCCPAN2細胞

BIU-87/Adr細胞類似產(chǎn)品：：OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞

WBF344細胞類似產(chǎn)品：：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞

Homo sapiens No. 578, breast cells細胞類似產(chǎn)品：：TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞

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