"SK-RC-52 Cell|人腎癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：腎癌；縱隔膜轉(zhuǎn)移

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對解凍細(xì)胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細(xì)胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時間和方法。在冷凍時細(xì)胞應(yīng)處于對數(shù)期。

細(xì)胞生長：貼壁

OVCAR-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WML2細(xì)胞、MBT2細(xì)胞、H-2591細(xì)胞

HS-294T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HF-91細(xì)胞、A172細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞

OVCAR 433細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO394細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞

HEP3B2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hos TE-85細(xì)胞、L-6細(xì)胞、RGB細(xì)胞

P116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TR-146細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞、HTR8細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

SK-RC-52 Cell|人腎癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

RPMI 8226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞

C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞

H1694細(xì)胞類似產(chǎn)品：：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞

SNU-869細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

RPMI 8226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLC1細(xì)胞、A204細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞

C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞

H1694細(xì)胞類似產(chǎn)品：：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞

SNU-869細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

RA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞

95-D細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Line 870 Emory University-4細(xì)胞、SHP77細(xì)胞、SCI1細(xì)胞

Colon 26細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、Ramos細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞

Panc-1-P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞

HCC0202細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B-CPAP細(xì)胞、HT-29/CX-1細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞

SNU-407細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞

OVCA-432細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞

Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HuH-28細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞、Molm14細(xì)胞

MA104細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞

JVM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞

SK-RC-52 Cell|人腎癌細(xì)胞

WPE-int細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-2108細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、BIC細(xì)胞

HPDLF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC2935細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞

hA549細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞

MES-SA Dx5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞

SVG p12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1688細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞、CAL78細(xì)胞

PLA-801C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞

PLA-801C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞

CCC-HPF-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：rHSC-99細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞

UCD-MLA-144細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞

Eca109細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞

UM-UC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞

A-172MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞

FLC7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞

SK Hep1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-324MED細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞

KYSE140細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞

HCC-1569細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WSUDLCL2細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞

NIH 3T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞

IOSE-80細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞

IHH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞

OEC33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞

alphaTC1 Clone 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞

H-1930細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞

Pan02細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.5細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞、EHEB細(xì)胞

Tn5B1-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞

C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞

JROECL21細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OsA-CL細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞

HCC-1395細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞

MFD-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞

Hep 3B2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞

SK-RC-52 Cell|人腎癌細(xì)胞

MCM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞

P3 88 D1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞

DHL-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞

JB6 [Mouse]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞

Calu 6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAN6細(xì)胞、H220細(xì)胞、K299細(xì)胞

GES1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞

IMR90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞

MFE296細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞

MFE296細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU-DHL1細(xì)胞、CCD-841CoTr細(xì)胞、HBL1細(xì)胞

HCT-GEO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞

Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H9c2 (2-1)細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞、M059K細(xì)胞

Hs 766.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞

SKES1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞

SK N SH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞

NPA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞

HCC-1143細(xì)胞類似產(chǎn)品：：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞

SCCVII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞

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